外(wai)泌(mi)(mi)體最早(zao)發(fa)現于體外(wai)培(pei)養的綿(mian)羊紅細(xi)胞(bao)上(shang)清液中(zhong)，是細(xi)胞(bao)主動分(fen)泌(mi)(mi)，大小(xiao)較為(wei)均一(yi)，直(zhi)徑為(wei)30~100納米(mi)，密度1.10~1.18 g/ml的囊泡(pao)樣小(xiao)體。隨著分(fen)子技術(shu)的不斷發(fa)展，生物學(xue)界對外(wai)泌(mi)(mi)體的探索日(ri)趨深入。2013年，三(san)位國外(wai)科學(xue)家因在細(xi)胞(bao)膜轉運機制的研究(jiu)上(shang)取(qu)得關鍵性突破，被授予諾貝爾生理學(xue)或醫學(xue)獎。由此，外(wai)泌(mi)(mi)體的研究(jiu)達到(dao)了一(yi)個全新的高度。

 

而近年(nian)來，越來越多的(de)證據(ju)顯(xian)示出外泌(mi)體對臨床治療的(de)重要價值。外泌(mi)體是細胞(bao)間信使，通過其數量和(he)生(sheng)物化學組成的(de)變化，可為(wei)進一步的(de)臨床診斷提供有力的(de)證據(ju)。它攜(xie)帶多種蛋白質和(he)miRNA，參與細胞(bao)信號轉導、細胞(bao)遷移、血管新生(sheng)和(he)腫瘤(liu)細胞(bao)生(sheng)長等過程(cheng)，并(bing)且有可能成為(wei)藥物的(de)天然(ran)載體，應用于腫瘤(liu)檢測或臨床治療。

 

但目前國(guo)內在(zai)外泌體研究方面的(de)(de)經驗十分(fen)有限，無論是離心法(fa)、過濾離心還是免疫磁(ci)珠法(fa)，都無法(fa)同時(shi)保證(zheng)外泌體的(de)(de)含量(liang)、純度(du)以及生物(wu)活性(xing)。這(zhe)首先就制(zhi)約了外泌體樣本的(de)(de)制(zhi)取，進(jin)而對后續的(de)(de)表征造成困(kun)難。而測量(liang)技術的(de)(de)局限性(xing)也(ye)極大地阻礙了外泌體在(zai)這(zhe)些領域(yu)的(de)(de)研究進(jin)展。

 

為(wei)了與(yu)國際(ji)先(xian)進水平(ping)接軌(gui)，同時推動中國醫(yi)(yi)療事業的(de)發展，使更多中國患者(zhe)獲得康復(fu)良機，廣州某(mou)三級甲等(deng)醫(yi)(yi)院(yuan)抓住(zhu)國內外泌體研(yan)究的(de)先(xian)機，于今年(nian)啟動了針對骨(gu)髓(sui)瘤(liu)的(de)外泌體表征工作(zuo)。但是首先(xian)，他們在研(yan)究設備的(de)選擇上犯了難。

 

在(zai)當前中國市場主流的(de)(de)外(wai)(wai)泌(mi)體表(biao)征(zheng)方(fang)法中，研究人員的(de)(de)選(xuan)擇一(yi)般有電子顯(xian)微鏡、流式細胞儀(yi)和動(dong)態(tai)光散射技術(shu)。但電子顯(xian)微鏡一(yi)次只(zhi)能觀(guan)測(ce)(ce)數量(liang)有限的(de)(de)顆粒(li)，在(zai)代表(biao)性上存在(zai)嚴重(zhong)不(bu)足，同(tong)時，由于電子顯(xian)微鏡的(de)(de)樣(yang)本(ben)制(zhi)備過程比較復(fu)雜，因(yin)此很(hen)容易造成(cheng)樣(yang)本(ben)的(de)(de)形態(tai)、狀態(tai)發生改變(bian)；流式細胞儀(yi)目前公認(ren)的(de)(de)測(ce)(ce)量(liang)顆粒(li)粒(li)徑(jing)下限為300nm左(zuo)右，大(da)大(da)超過了外(wai)(wai)泌(mi)體的(de)(de)粒(li)徑(jing)上限；而(er)動(dong)態(tai)光散射技術(shu)不(bu)適合多分散的(de)(de)復(fu)雜外(wai)(wai)泌(mi)體樣(yang)本(ben)的(de)(de)測(ce)(ce)量(liang)，且無法得(de)出樣(yang)品(pin)中外(wai)(wai)泌(mi)體的(de)(de)濃度。

 

后(hou)來(lai)，經過對(dui)國(guo)際上(shang)最頂尖的研(yan)究設備(bei)進行慎重分(fen)析和(he)比對(dui)，該(gai)醫(yi)院(yuan)開始留意英國(guo)馬爾(er)文(wen)儀器有(you)限公司（以(yi)下(xia)簡稱(cheng)“馬爾(er)文(wen)”）的產品(pin)。作為全(quan)(quan)球材料和(he)生(sheng)物(wu)(wu)物(wu)(wu)理表(biao)征領(ling)域(yu)的領(ling)先企業(ye)，馬爾(er)文(wen)為全(quan)(quan)球眾(zhong)多客戶提供高性能的粒(li)度(du)表(biao)征解決(jue)方(fang)案(an)，在(zai)業(ye)界享有(you)盛譽。特(te)別(bie)是其采用了(le)全(quan)(quan)新一代納米顆(ke)(ke)粒(li)跟蹤分(fen)析技(ji)術（馬爾(er)文(wen)專(zhuan)利技(ji)術，以(yi)下(xia)簡稱(cheng)NTA）的NanoSight產品(pin)系列，可(ke)以(yi)直接(jie)并實時(shi)觀測(ce)納米顆(ke)(ke)粒(li)，通過光學(xue)顯微(wei)鏡收(shou)集納米顆(ke)(ke)粒(li)的散(san)射(she)光信號，拍攝其在(zai)溶(rong)液(ye)中做布(bu)朗運動的影像，再對(dui)每個顆(ke)(ke)粒(li)的布(bu)朗運動進行追(zhui)蹤和(he)分(fen)析，從而計算出納米顆(ke)(ke)粒(li)的流體(ti)力(li)學(xue)半徑和(he)濃度(du)。這(zhe)一新穎(ying)的納米顆(ke)(ke)粒(li)表(biao)征方(fang)法立即吸引了(le)該(gai)家醫(yi)院(yuan)。果(guo)然，馬爾(er)文(wen)沒(mei)有(you)讓(rang)他們失(shi)望。

 

完善功能全方位響應客戶需求

從接(jie)洽到(dao)接(jie)受NTA技術，僅在短短的(de)3個月內該(gai)醫院就決定采用馬(ma)爾(er)文(wen)NanoSight系列最新型號的(de)產品——NS 300納(na)米顆粒跟蹤(zong)分析儀（以(yi)下(xia)簡(jian)稱“NS 300”）。對此(ci)次合作，馬(ma)爾(er)文(wen)NanoSight產品專(zhuan)家梅(mei)潔(jie)先生表示：“說服客戶的(de)不是(shi)我(wo)們的(de)專(zhuan)家，而是(shi)馬(ma)爾(er)文(wen)的(de)產品本身。”

 

 在為(wei)該醫院提供(gong)詳細的(de)設備培訓后，馬爾(er)文(wen)NS 300便馬上投入到了(le)研(yan)究使用(yong)中。很(hen)快，它憑借卓越高效的(de)性能和方便快捷的(de)操作獲得了(le)客戶研(yan)究團(tuan)隊(dui)的(de)普(pu)遍認可。

 

出色的質控作用

 

外(wai)泌(mi)體(ti)的(de)提取(qu)一(yi)(yi)直(zhi)以(yi)來都是(shi)橫亙(gen)在所(suo)有相關研究者面(mian)前的(de)一(yi)(yi)道(dao)難題。生物細胞中的(de)囊泡種類繁多，怎樣證明提取(qu)的(de)顆粒(li)一(yi)(yi)定就(jiu)是(shi)外(wai)泌(mi)體(ti)呢(ni)？電子(zi)顯微(wei)鏡(jing)在鑒定一(yi)(yi)定數量的(de)顆粒(li)屬性方面(mian)固(gu)然有效，但(dan)如前所(suo)述，電子(zi)顯微(wei)鏡(jing)不(bu)適合對(dui)大量顆粒(li)進行(xing)快速(su)分析，而動態光(guang)散射(she)技(ji)術又只能對(dui)分布相對(dui)均一(yi)(yi)的(de)樣本顆粒(li)進行(xing)檢(jian)測，并且不(bu)具(ju)備熒光(guang)功能。

 

配(pei)備(bei)了先進NTA檢測技術(shu)的(de)(de)馬爾(er)文NS 300在這時便體(ti)(ti)現出強大(da)的(de)(de)功能(neng)：它能(neng)夠進行嚴(yan)格的(de)(de)質控(kong)，通(tong)過對(dui)(dui)觀察到的(de)(de)所有顆粒進行分(fen)析和(he)計算，第一時間給出樣(yang)(yang)本粒度的(de)(de)詳細分(fen)布和(he)濃度的(de)(de)具體(ti)(ti)信息。同(tong)時，研(yan)究(jiu)人員(yuan)還(huan)可以利用熒(ying)光標定重點的(de)(de)特定外(wai)泌體(ti)(ti)顆粒，從四種不同(tong)波(bo)長(chang)——405nm、 488nm、 532nm和(he)635nm——的(de)(de)激光器中選擇一款，搭配(pei)相應的(de)(de)濾(lv)光片，從而(er)實現對(dui)(dui)熒(ying)光樣(yang)(yang)品的(de)(de)測量，再由NTA技術(shu)對(dui)(dui)其進行單獨檢測，免受復雜樣(yang)(yang)本（如血清、尿液等）環境的(de)(de)影(ying)響。對(dui)(dui)復雜樣(yang)(yang)品的(de)(de)分(fen)辨能(neng)力對(dui)(dui)于像外(wai)泌體(ti)(ti)這樣(yang)(yang)的(de)(de)研(yan)究(jiu)對(dui)(dui)象來說至關重要。

 

尤為關(guan)(guan)鍵的(de)(de)(de)是(shi)，由于(yu)(yu)NTA的(de)(de)(de)工作(zuo)原(yuan)理是(shi)通過(guo)將一束能(neng)量(liang)集中(zhong)的(de)(de)(de)激光穿過(guo)玻璃(li)棱鏡對樣(yang)品（懸浮(fu)顆粒(li)(li)(li)(li)的(de)(de)(de)溶液）進(jin)行照射(she)，配以玻璃(li)表面鍍鉻使(shi)背景信號最小化，可讓(rang)研究(jiu)人員通過(guo)顯微鏡直(zhi)接觀察到納米(mi)顆粒(li)(li)(li)(li)在溶液中(zhong)的(de)(de)(de)布朗(lang)運動，并拍攝影(ying)像(xiang)，對每(mei)個(ge)顆粒(li)(li)(li)(li)的(de)(de)(de)布朗(lang)運動進(jin)行追蹤和分(fen)析(xi)，快速準(zhun)確地計算(suan)出樣(yang)本中(zhong)納米(mi)顆粒(li)(li)(li)(li)的(de)(de)(de)流體力學半徑(jing)(jing)和濃度(du)。相對于(yu)(yu)其他傳(chuan)統技(ji)術，NTA能(neng)對懸浮(fu)液中(zhong)粒(li)(li)(li)(li)徑(jing)(jing)范圍為10nm-2000nm的(de)(de)(de)顆粒(li)(li)(li)(li)進(jin)行全方位表征，并且兼具極高的(de)(de)(de)分(fen)辨率，對于(yu)(yu)粒(li)(li)(li)(li)度(du)較為接近的(de)(de)(de)顆粒(li)(li)(li)(li)仍然可以準(zhun)確分(fen)析(xi)，特別適用(yong)于(yu)(yu)外泌體、蛋白質聚集、藥物(wu)傳(chuan)輸、納米(mi)顆粒(li)(li)(li)(li)毒理、病(bing)毒和疫苗等復(fu)雜(za)體系的(de)(de)(de)相關(guan)(guan)研究(jiu)。

 

另外，馬(ma)爾(er)文(wen)NanoSight還可(ke)以(yi)測定(ding)顆(ke)粒的(de)數量(liang)，準確指示樣本溶液中(zhong)的(de)單位體積(ji)顆(ke)粒濃度(du)和顆(ke)粒數量(liang)，進行以(yi)量(liang)為基準的(de)粒徑測試(shi)和分布(bu)測試(shi)。對于客戶可(ke)能存在的(de)樣本量(liang)不足(zu)的(de)研究情(qing)況，馬(ma)爾(er)文(wen)NS 300也能通過(guo)支持低濃度(du)測試(shi)（最低可(ke)達到300微升）幫(bang)助(zhu)實現既(ji)定(ding)監測目標；而同樣的(de)條件，傳(chuan)統電子顯微鏡(jing)很難實現有效(xiao)的(de)統計學(xue)分析(xi)。

 

操作簡便、工作效率高

 

通常，大型(xing)儀(yi)器(qi)（如流式細胞儀(yi)）在使(shi)用前(qian)都需要進(jin)行復雜(za)的(de)(de)預(yu)熱和(he)校準準備(bei)。馬爾(er)文NS 300則無需這樣做(zuo)，它只要連上電源就能直(zhi)接使(shi)用。并且(qie)由于NTA技術采用的(de)(de)是(shi)斯(si)托(tuo)克斯(si)-愛因斯(si)坦方(fang)程的(de)(de)計算(suan)，所提供的(de)(de)是(shi)一個無關(guan)質量、折光度和(he)顆粒(li)材料的(de)(de)流體(ti)力學直(zhi)徑，因此儀(yi)器(qi)可跳過繁(fan)瑣(suo)的(de)(de)校準直(zhi)接進(jin)入研究(jiu)分析，為工作人員節省研究(jiu)前(qian)的(de)(de)時間。

 

作為(wei)一種集成(cheng)程(cheng)度(du)和自動化(hua)程(cheng)度(du)都非常(chang)高的(de)(de)(de)儀器，馬爾(er)文(wen)NS 300除了(le)將(jiang)軟硬(ying)件設(she)備(bei)、攝(she)像頭和顯(xian)微鏡等集于(yu)(yu)一體，還整合了(le)顆粒(li)檢(jian)測功能(neng)與(yu)納米(mi)顆粒(li)分(fen)析技術，為(wei)納米(mi)顆粒(li)表征(zheng)提供易于(yu)(yu)使用的(de)(de)(de)可重復平臺(tai)。1000px x 625px的(de)(de)(de)設(she)備(bei)主(zhu)機集成(cheng)了(le)超高靈敏度(du)科研(yan)級sCMOS光電傳感器、溫控單(dan)元和一個(ge)具(ju)有(you)四(si)種可選波長的(de)(de)(de)激光。樣品池和激光模(mo)塊也能(neng)輕易的(de)(de)(de)拆卸(xie)和組(zu)裝，便(bian)于(yu)(yu)移動、清潔(jie)，適合高通量檢(jian)測。強(qiang)(qiang)大的(de)(de)(de)軟件分(fen)析能(neng)力讓馬爾(er)文(wen)NS 300在(zai)極短的(de)(de)(de)時間內就(jiu)能(neng)繪制出(chu)粒(li)徑(jing)—對應數量分(fen)布強(qiang)(qiang)度(du)—顆粒(li)散(san)射光強(qiang)(qiang)的(de)(de)(de)三維(wei)圖譜，并得(de)出(chu)與(yu)各(ge)種粒(li)徑(jing)顆粒(li)有(you)關的(de)(de)(de)全面信息。這樣不(bu)僅減(jian)少了(le)人(ren)為(wei)操作失誤的(de)(de)(de)概(gai)率(lv)，更大大提高了(le)研(yan)究人(ren)員的(de)(de)(de)工作效率(lv)。

 

據該客(ke)戶(hu)介紹，在使用馬爾文(wen)儀器NS 300之前(qian)，原本(ben)使用流式細胞儀做(zuo)4個(ge)(ge)實(shi)驗項目，可能要花一個(ge)(ge)下午的時間，而現在用馬爾文(wen)NS 300，一個(ge)(ge)小(xiao)時就能輕松搞定，且分析結果全面、可靠。對他(ta)們來說，這不(bu)光(guang)節(jie)約了(le)大量的時間，加速推進整個(ge)(ge)科研進程，還(huan)為醫院(yuan)節(jie)省了(le)寶貴的人力成本(ben)。

 

“市(shi)面上(shang)(shang)常見(jian)的(de)表征儀器往往只具有單一的(de)功(gong)能(neng)，無法滿足我們全方位(wei)的(de)要求，之所以最后選擇(ze)馬(ma)爾文NS 300也正(zheng)是考慮到(dao)(dao)它(ta)在功(gong)能(neng)上(shang)(shang)的(de)完(wan)善。可以說，到(dao)(dao)目(mu)前為止，NS 300給我們提供(gong)了很大的(de)幫助(zhu)。”該醫院血液科某唐姓醫生表示。

 

外泌(mi)(mi)體(ti)最早發現于體(ti)外培養的(de)綿羊紅(hong)細(xi)胞上(shang)清液中，是細(xi)胞主(zhu)動分泌(mi)(mi)，大小(xiao)較為(wei)均(jun)一，直徑為(wei)30~100納米，密度1.10~1.18 g/ml的(de)囊泡樣小(xiao)體(ti)。隨著分子技(ji)術的(de)不斷發展，生物學界(jie)對外泌(mi)(mi)體(ti)的(de)探索日趨深入。2013年，三位(wei)國外科學家因(yin)在細(xi)胞膜轉運機制(zhi)的(de)研究上(shang)取(qu)得關(guan)鍵性突破，被授予諾貝爾生理學或醫學獎。由此，外泌(mi)(mi)體(ti)的(de)研究達到了一個全(quan)新的(de)高度。

 

而近年來(lai)，越來(lai)越多的(de)(de)證據顯示出外(wai)(wai)泌體對(dui)臨床(chuang)治療的(de)(de)重要價值。外(wai)(wai)泌體是細(xi)胞間(jian)信使，通(tong)過(guo)(guo)其數量和(he)生物化學組(zu)成的(de)(de)變化，可為進(jin)一步(bu)的(de)(de)臨床(chuang)診(zhen)斷(duan)提供有力(li)的(de)(de)證據。它(ta)攜帶多種蛋(dan)白質和(he)miRNA，參與(yu)細(xi)胞信號轉導、細(xi)胞遷移(yi)、血管(guan)新生和(he)腫(zhong)瘤細(xi)胞生長等過(guo)(guo)程，并且有可能成為藥(yao)物的(de)(de)天然載體，應用于腫(zhong)瘤檢測或臨床(chuang)治療。

 

但目前(qian)國(guo)內在(zai)外泌(mi)體研(yan)究方面的(de)經驗十分有限(xian)，無論是(shi)離(li)心法、過濾離(li)心還是(shi)免疫磁(ci)珠法，都無法同時(shi)保證外泌(mi)體的(de)含量、純度以及生(sheng)物(wu)活性。這首先就制(zhi)約了外泌(mi)體樣本的(de)制(zhi)取，進而對后(hou)續的(de)表征造成困難。而測(ce)量技(ji)術的(de)局限(xian)性也(ye)極大地阻礙了外泌(mi)體在(zai)這些領域的(de)研(yan)究進展。

 

為了與國際先進水(shui)平接軌，同時(shi)推動(dong)中國醫(yi)療事業的(de)(de)發展，使更多中國患者獲得(de)康復良機(ji)，廣州(zhou)某三級甲等醫(yi)院(yuan)抓住國內(nei)外泌(mi)體(ti)研(yan)究的(de)(de)先機(ji)，于今年啟(qi)動(dong)了針對骨(gu)髓(sui)瘤的(de)(de)外泌(mi)體(ti)表征工作(zuo)。但是首先，他們在研(yan)究設備的(de)(de)選擇(ze)上犯了難。

 

在當前中國市場(chang)主(zhu)流的(de)(de)外泌(mi)體表征方法(fa)(fa)中，研究人員(yuan)的(de)(de)選擇一般(ban)有電子顯微(wei)鏡(jing)、流式細胞儀和動(dong)(dong)態(tai)(tai)(tai)(tai)光(guang)散(san)射技(ji)(ji)術。但電子顯微(wei)鏡(jing)一次只能(neng)觀測數量(liang)有限的(de)(de)顆(ke)粒，在代表性上(shang)存在嚴(yan)重(zhong)不足，同時，由于電子顯微(wei)鏡(jing)的(de)(de)樣本(ben)(ben)(ben)制備過程比較復雜，因此(ci)很容易造成樣本(ben)(ben)(ben)的(de)(de)形(xing)態(tai)(tai)(tai)(tai)、狀(zhuang)態(tai)(tai)(tai)(tai)發生改變；流式細胞儀目前公認的(de)(de)測量(liang)顆(ke)粒粒徑下限為300nm左右，大大超過了外泌(mi)體的(de)(de)粒徑上(shang)限；而動(dong)(dong)態(tai)(tai)(tai)(tai)光(guang)散(san)射技(ji)(ji)術不適合多分散(san)的(de)(de)復雜外泌(mi)體樣本(ben)(ben)(ben)的(de)(de)測量(liang)，且(qie)無(wu)法(fa)(fa)得出樣品中外泌(mi)體的(de)(de)濃度(du)。

 

后來，經過(guo)對(dui)國際上最頂(ding)尖的(de)研究設備進(jin)行慎重分析(xi)和(he)比(bi)對(dui)，該(gai)醫院開始留意英(ying)國馬(ma)爾(er)文(wen)儀(yi)器有限公司(si)（以下簡(jian)稱“馬(ma)爾(er)文(wen)”）的(de)產(chan)品。作為(wei)(wei)全(quan)球(qiu)材(cai)料和(he)生物(wu)物(wu)理表(biao)征(zheng)領域的(de)領先企業，馬(ma)爾(er)文(wen)為(wei)(wei)全(quan)球(qiu)眾多客戶提供(gong)高(gao)性能的(de)粒(li)(li)(li)度表(biao)征(zheng)解決方(fang)案，在(zai)業界享有盛譽。特(te)別是其采用了全(quan)新一(yi)代納(na)米(mi)顆(ke)粒(li)(li)(li)跟蹤(zong)分析(xi)技(ji)術(shu)（馬(ma)爾(er)文(wen)專利技(ji)術(shu)，以下簡(jian)稱NTA）的(de)NanoSight產(chan)品系列(lie)，可以直(zhi)接并實時觀(guan)測納(na)米(mi)顆(ke)粒(li)(li)(li)，通過(guo)光學(xue)顯微鏡收(shou)集納(na)米(mi)顆(ke)粒(li)(li)(li)的(de)散(san)射光信(xin)號，拍攝其在(zai)溶液中做(zuo)布朗運(yun)(yun)動(dong)的(de)影像，再對(dui)每(mei)個顆(ke)粒(li)(li)(li)的(de)布朗運(yun)(yun)動(dong)進(jin)行追蹤(zong)和(he)分析(xi)，從而計算出納(na)米(mi)顆(ke)粒(li)(li)(li)的(de)流體力學(xue)半(ban)徑和(he)濃度。這一(yi)新穎的(de)納(na)米(mi)顆(ke)粒(li)(li)(li)表(biao)征(zheng)方(fang)法立即(ji)吸(xi)引了該(gai)家醫院。果然，馬(ma)爾(er)文(wen)沒有讓(rang)他們失望(wang)。

 

完善功能全方位響應客戶需求

從接洽到接受(shou)NTA技術，僅在短(duan)短(duan)的(de)(de)3個月內該醫院就決定采用馬(ma)(ma)爾文NanoSight系列最新型(xing)號的(de)(de)產(chan)品——NS 300納米顆粒跟蹤分(fen)析儀（以(yi)下簡稱(cheng)“NS 300”）。對此次合作，馬(ma)(ma)爾文NanoSight產(chan)品專(zhuan)家(jia)梅(mei)潔(jie)先(xian)生表示：“說服客戶的(de)(de)不是我們的(de)(de)專(zhuan)家(jia)，而是馬(ma)(ma)爾文的(de)(de)產(chan)品本(ben)身。”

 

在為該醫院(yuan)提供詳細的設備培訓(xun)后(hou)，馬爾文NS 300便馬上(shang)投入到了(le)研(yan)究(jiu)使(shi)用中。很快，它憑借卓(zhuo)越高效(xiao)的性能和方便快捷的操作獲得了(le)客(ke)戶研(yan)究(jiu)團(tuan)隊的普遍(bian)認可。

 

出色的質控作用

 

外泌體(ti)(ti)的提(ti)取一直以來都是橫亙在(zai)所(suo)有相關(guan)研究者面前的一道難題。生物細(xi)胞(bao)中的囊(nang)泡種類繁多，怎樣證明提(ti)取的顆(ke)粒一定就是外泌體(ti)(ti)呢？電子顯微(wei)鏡(jing)(jing)在(zai)鑒定一定數量的顆(ke)粒屬性方(fang)面固然(ran)有效，但如(ru)前所(suo)述，電子顯微(wei)鏡(jing)(jing)不適合(he)對大量顆(ke)粒進行(xing)快速分析(xi)，而動(dong)態光(guang)散射(she)技術又只能對分布相對均一的樣本(ben)顆(ke)粒進行(xing)檢測，并且不具備(bei)熒光(guang)功(gong)能。

 

配(pei)備了先進(jin)NTA檢測技術的(de)(de)(de)馬爾(er)文NS 300在這(zhe)時便(bian)體(ti)現(xian)出強大的(de)(de)(de)功能：它能夠進(jin)行(xing)嚴格的(de)(de)(de)質控(kong)，通(tong)過對(dui)(dui)觀察到的(de)(de)(de)所有顆粒(li)進(jin)行(xing)分(fen)析和計(ji)算，第一(yi)時間給出樣本(ben)粒(li)度(du)的(de)(de)(de)詳細(xi)分(fen)布和濃度(du)的(de)(de)(de)具體(ti)信息。同(tong)時，研究(jiu)人員還可以利用(yong)熒光標定重點的(de)(de)(de)特(te)定外泌(mi)體(ti)顆粒(li)，從(cong)四(si)種(zhong)不同(tong)波長——405nm、 488nm、 532nm和635nm——的(de)(de)(de)激(ji)光器中選(xuan)擇一(yi)款(kuan)，搭配(pei)相應的(de)(de)(de)濾光片，從(cong)而實(shi)現(xian)對(dui)(dui)熒光樣品(pin)(pin)的(de)(de)(de)測量，再由NTA技術對(dui)(dui)其進(jin)行(xing)單獨(du)檢測，免受(shou)復(fu)雜(za)樣本(ben)（如血(xue)清(qing)、尿液等）環境(jing)的(de)(de)(de)影響。對(dui)(dui)復(fu)雜(za)樣品(pin)(pin)的(de)(de)(de)分(fen)辨能力(li)對(dui)(dui)于像外泌(mi)體(ti)這(zhe)樣的(de)(de)(de)研究(jiu)對(dui)(dui)象來說至(zhi)關重要。

 

尤(you)為關鍵(jian)的(de)(de)(de)是(shi)，由于NTA的(de)(de)(de)工(gong)作原理(li)是(shi)通(tong)過將一(yi)束能量集(ji)(ji)中的(de)(de)(de)激光穿過玻璃(li)棱鏡對(dui)樣品（懸(xuan)浮(fu)顆(ke)(ke)粒(li)(li)的(de)(de)(de)溶(rong)液）進(jin)(jin)行(xing)照射，配以玻璃(li)表面(mian)鍍鉻使背景信號最小(xiao)化，可讓研(yan)究人員通(tong)過顯微鏡直接觀察到納米(mi)顆(ke)(ke)粒(li)(li)在溶(rong)液中的(de)(de)(de)布朗(lang)運動，并(bing)拍攝影像，對(dui)每個顆(ke)(ke)粒(li)(li)的(de)(de)(de)布朗(lang)運動進(jin)(jin)行(xing)追蹤(zong)和分析，快速準確地(di)計算出(chu)樣本中納米(mi)顆(ke)(ke)粒(li)(li)的(de)(de)(de)流體(ti)力學半徑和濃度。相對(dui)于其他傳統技(ji)術，NTA能對(dui)懸(xuan)浮(fu)液中粒(li)(li)徑范圍為10nm-2000nm的(de)(de)(de)顆(ke)(ke)粒(li)(li)進(jin)(jin)行(xing)全方位表征，并(bing)且兼具(ju)極高(gao)的(de)(de)(de)分辨率，對(dui)于粒(li)(li)度較為接近(jin)的(de)(de)(de)顆(ke)(ke)粒(li)(li)仍然(ran)可以準確分析，特別適用于外(wai)泌(mi)體(ti)、蛋白質聚(ju)集(ji)(ji)、藥物傳輸、納米(mi)顆(ke)(ke)粒(li)(li)毒理(li)、病毒和疫苗等(deng)復雜體(ti)系的(de)(de)(de)相關研(yan)究。

 

另外，馬爾文NanoSight還(huan)可(ke)(ke)以測定顆粒的(de)數量，準確指示樣(yang)(yang)本溶(rong)液中的(de)單位體(ti)積顆粒濃度和(he)顆粒數量，進行以量為基(ji)準的(de)粒徑測試和(he)分布測試。對于(yu)客戶可(ke)(ke)能存(cun)在的(de)樣(yang)(yang)本量不足的(de)研究情(qing)況(kuang)，馬爾文NS 300也能通過支持低(di)濃度測試（最(zui)低(di)可(ke)(ke)達到300微升）幫助實(shi)(shi)現既定監測目標；而同樣(yang)(yang)的(de)條件(jian)，傳統電子(zi)顯微鏡很(hen)難實(shi)(shi)現有(you)效的(de)統計學(xue)分析。

 

操作簡便、工作效率高

 

通常，大型儀器（如(ru)流式細胞(bao)儀）在使用(yong)前都需(xu)要進(jin)行復雜的(de)預(yu)熱和校準(zhun)(zhun)準(zhun)(zhun)備。馬爾文NS 300則無(wu)需(xu)這樣做，它(ta)只要連上電(dian)源(yuan)就能(neng)直接(jie)(jie)使用(yong)。并(bing)且由于NTA技術采用(yong)的(de)是斯(si)托克(ke)斯(si)-愛因(yin)斯(si)坦方程(cheng)的(de)計算，所提(ti)供的(de)是一個(ge)無(wu)關(guan)質量、折光(guang)度和顆(ke)粒(li)材料的(de)流體力學直徑(jing)，因(yin)此儀器可跳過(guo)繁瑣的(de)校準(zhun)(zhun)直接(jie)(jie)進(jin)入研(yan)(yan)究分析，為工作人員節省研(yan)(yan)究前的(de)時(shi)間。

 

作為(wei)一種集成(cheng)程度和(he)自動(dong)化程度都非常高(gao)(gao)的(de)(de)(de)(de)儀器(qi)，馬爾(er)文NS 300除(chu)了將軟硬件設(she)備、攝像頭(tou)和(he)顯微鏡等集于一體，還整(zheng)合了顆(ke)(ke)粒(li)(li)(li)(li)檢(jian)測(ce)功能與納米顆(ke)(ke)粒(li)(li)(li)(li)分析(xi)技(ji)術，為(wei)納米顆(ke)(ke)粒(li)(li)(li)(li)表征提供(gong)易(yi)于使(shi)用的(de)(de)(de)(de)可(ke)重復平臺。1000px x 625px的(de)(de)(de)(de)設(she)備主機集成(cheng)了超高(gao)(gao)靈(ling)敏度科研(yan)級(ji)sCMOS光(guang)(guang)電傳感器(qi)、溫控(kong)單元和(he)一個(ge)具有四種可(ke)選波(bo)長的(de)(de)(de)(de)激光(guang)(guang)。樣品池和(he)激光(guang)(guang)模(mo)塊也能輕易(yi)的(de)(de)(de)(de)拆卸和(he)組(zu)裝(zhuang)，便(bian)于移(yi)動(dong)、清潔，適合高(gao)(gao)通量檢(jian)測(ce)。強大的(de)(de)(de)(de)軟件分析(xi)能力讓馬爾(er)文NS 300在極短的(de)(de)(de)(de)時間(jian)內就能繪制出(chu)粒(li)(li)(li)(li)徑(jing)(jing)—對應數(shu)量分布強度—顆(ke)(ke)粒(li)(li)(li)(li)散射(she)光(guang)(guang)強的(de)(de)(de)(de)三維圖譜，并得出(chu)與各種粒(li)(li)(li)(li)徑(jing)(jing)顆(ke)(ke)粒(li)(li)(li)(li)有關的(de)(de)(de)(de)全面信(xin)息。這樣不僅減少(shao)了人為(wei)操作失誤的(de)(de)(de)(de)概率，更大大提高(gao)(gao)了研(yan)究(jiu)人員(yuan)的(de)(de)(de)(de)工作效率。

 

據該客戶介紹(shao)，在(zai)使用馬(ma)爾(er)文(wen)儀(yi)器NS 300之(zhi)前，原本使用流(liu)式細胞儀(yi)做(zuo)4個(ge)實驗(yan)項目，可能要花一個(ge)下(xia)午(wu)的(de)時間，而現在(zai)用馬(ma)爾(er)文(wen)NS 300，一個(ge)小時就能輕松搞定，且分(fen)析結(jie)果(guo)全面(mian)、可靠。對他們來說，這不(bu)光節約了(le)大量的(de)時間，加速推(tui)進(jin)整個(ge)科研進(jin)程(cheng)，還為醫院節省了(le)寶貴的(de)人力成本。

 

“市(shi)面上常見的(de)表征(zheng)儀器往往只具有單一的(de)功(gong)能，無(wu)法滿足我們全方位(wei)的(de)要求，之所(suo)以最后選擇馬(ma)爾文(wen)NS 300也(ye)正(zheng)是考慮到(dao)它在功(gong)能上的(de)完善。可以說，到(dao)目前為止(zhi)，NS 300給我們提(ti)供了很大的(de)幫助。”該醫院血(xue)液(ye)科某唐姓醫生表示。

 

增值服務保障產品最佳狀態

作為(wei)顆(ke)粒物表征技(ji)(ji)術(shu)的市場領導(dao)者，馬爾文不(bu)斷把(ba)行業中的頂(ding)尖技(ji)(ji)術(shu)帶到中國，讓客戶(hu)買到的不(bu)只是(shi)一個硬件，而(er)是(shi)一整套(tao)解決方案(an)。除了(le)技(ji)(ji)術(shu)創新，馬爾文也一貫注重客戶(hu)服務，其技(ji)(ji)術(shu)團隊人數(shu)是(shi)銷售(shou)團隊的3倍，涵蓋(gai)了(le)學術(shu)級專(zhuan)家、應用專(zhuan)家和(he)服務工程師等，他們會參與客戶(hu)的研究工作，深入了(le)解客戶(hu)需(xu)求，為(wei)其提升產品價值(zhi)。

 

在(zai)此(ci)次(ci)合作(zuo)中，除了(le)高品(pin)質(zhi)的(de)(de)(de)(de)產品(pin)，馬爾文(wen)所提(ti)(ti)供的(de)(de)(de)(de)專業的(de)(de)(de)(de)應(ying)用(yong)支持，也(ye)(ye)是(shi)該醫(yi)院選擇馬爾文(wen)的(de)(de)(de)(de)關(guan)鍵原(yuan)因(yin)。在(zai)設(she)備采購(gou)的(de)(de)(de)(de)溝通階段，馬爾文(wen)就為客戶(hu)提(ti)(ti)供了(le)細(xi)致的(de)(de)(de)(de)產品(pin)咨(zi)詢，幫助他們根據具體(ti)的(de)(de)(de)(de)研究(jiu)需(xu)要采購(gou)設(she)備。而在(zai)開始(shi)使用(yong)階段，馬爾文(wen)也(ye)(ye)安排(pai)了(le)專業的(de)(de)(de)(de)指導培訓，并(bing)針(zhen)對客戶(hu)的(de)(de)(de)(de)實驗應(ying)用(yong)環境給出許多專業建議(yi)，幫助客戶(hu)迅速熟(shu)悉設(she)備，滿足(zu)特定實驗目標的(de)(de)(de)(de)需(xu)求，更快、更好、更有針(zhen)對性地獲得技術表征結果。

 

在售后階段，馬爾(er)文的(de)工(gong)程師們(men)也為該醫院提供了全面的(de)維修和維護(hu)服務，快速響(xiang)應他們(men)的(de)要(yao)求，幫(bang)助他們(men)診(zhen)斷并解決設備在使用(yong)過(guo)程中遇(yu)到的(de)問題(ti)，確保儀(yi)器始終處(chu)在最(zui)佳的(de)工(gong)作狀態，提升客戶滿意(yi)度。

 

總結與展望

在(zai)(zai)馬爾文NS 300的(de)幫助下，該醫院的(de)外泌(mi)體研(yan)究表征上(shang)目(mu)前(qian)已(yi)取得了初步進展(zhan)，以有(you)(you)力的(de)證(zheng)據驗證(zheng)了正常組(zu)織細胞和(he)腫瘤組(zu)織細胞在(zai)(zai)外泌(mi)體粒徑(jing)及粒徑(jing)分布濃度(du)上(shang)的(de)差異。目(mu)前(qian)，更(geng)多實驗還(huan)在(zai)(zai)進行過程(cheng)中，相信有(you)(you)馬爾文NS 300的(de)鼎力支持，不(bu)久(jiu)的(de)將來會有(you)(you)更(geng)多科(ke)研(yan)進展(zhan)呈現。

 

雖然(ran)外(wai)泌(mi)(mi)體(ti)作(zuo)為(wei)生物標志物的(de)(de)(de)(de)(de)研(yan)究在國(guo)內尚處于起步(bu)階段，但(dan)它在臨床(chuang)治療領域(yu)已顯現(xian)出巨大(da)的(de)(de)(de)(de)(de)發(fa)展潛力。在臨床(chuang)診斷中，簡單(dan)快速地在復雜生物背景下測量(liang)外(wai)泌(mi)(mi)體(ti)濃(nong)(nong)(nong)度、粒徑是必備(bei)要求，目前存在的(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)法都無法完美(mei)地解決(jue)這一(yi)問(wen)題。NTA作(zuo)為(wei)一(yi)項全新的(de)(de)(de)(de)(de)測量(liang)技(ji)術，具有實時觀測和(he)熒光測量(liang)功(gong)能，能夠以(yi)較高的(de)(de)(de)(de)(de)分辨率，準(zhun)確(que)地測量(liang)顆(ke)粒濃(nong)(nong)(nong)度，從而(er)為(wei)外(wai)泌(mi)(mi)體(ti)大(da)小(xiao)和(he)濃(nong)(nong)(nong)度研(yan)究提供新的(de)(de)(de)(de)(de)思路(lu)。而(er)隨著越來越多科研(yan)機構與研(yan)究項目成果的(de)(de)(de)(de)(de)進一(yi)步(bu)披露，以(yi)馬爾(er)文NanoSight為(wei)代表的(de)(de)(de)(de)(de)新一(yi)代NTA技(ji)術將(jiang)會為(wei)推(tui)進外(wai)泌(mi)(mi)體(ti)研(yan)究乃至人(ren)類健康事業的(de)(de)(de)(de)(de)發(fa)展做出更(geng)大(da)貢獻。