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微生物檢測能力驗證注意事項有哪些?

2022-06-01 作者(zhe): 瀏(liu)覽數:1055

  實驗(yan)(yan)室(shi)(shi)(shi)能(neng)力驗(yan)(yan)證和室(shi)(shi)(shi)間比(bi)對活動是(shi)判定實驗(yan)(yan)室(shi)(shi)(shi)檢(jian)測能(neng)力的(de)重要手段之一,不(bu)但(dan)可以提高實驗(yan)(yan)室(shi)(shi)(shi)的(de)檢(jian)測能(neng)力和技(ji)術水(shui)平,發現實驗(yan)(yan)室(shi)(shi)(shi)操作技(ji)術和質量管理上存在的(de)問題,還能(neng)增加客戶以及相關方(fang)對實驗(yan)(yan)室(shi)(shi)(shi)的(de)信任。

  今天小編和大家一起來(lai)看看微生物(wu)能力驗證注(zhu)意事項有哪些?

  01、能力驗(yan)證樣(yang)品接收及(ji)準備

  1、操作(zuo)前仔細閱讀(du)參(can)考指(zhi)導書(shu),關鍵是小的(de)備注要(yao)注意,很多特殊(shu)情況的(de)處理大(da)都在(zai)備注里(li)。

  2、樣(yang)(yang)品接收前(qian)的(de)檢(jian)查很重要,首(shou)先對(dui)樣(yang)(yang)品的(de)完(wan)整性進行檢(jian)查,對(dui)信息的(de)閱(yue)讀要全面,如果發(fa)現樣(yang)(yang)品有問題及時(shi)溝通(tong),這樣(yang)(yang)要比做樣(yang)(yang)品的(de)時(shi)候在(zai)發(fa)現來的(de)要及時(shi),能節省不(bu)少的(de)時(shi)間;

  3、作(zuo)業(ye)指導(dao)書(shu)的(de)(de)(de)(de)(de)閱讀(du)要到(dao)位,很(hen)多能力驗(yan)(yan)證樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)寄到(dao)后(hou)要跟一(yi)份作(zuo)業(ye)指導(dao)書(shu),作(zuo)業(ye)指導(dao)書(shu)中往(wang)往(wang)會(hui)對本次能力驗(yan)(yan)證的(de)(de)(de)(de)(de)樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)、成分、尺(chi)寸、選(xuan)擇方法、樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)的(de)(de)(de)(de)(de)結果(guo)記錄、包括(kuo)修約或樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)的(de)(de)(de)(de)(de)粘貼(tie)、樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)寄發(fa)的(de)(de)(de)(de)(de)注意事項等(deng)有(you)明確的(de)(de)(de)(de)(de)規定,熟讀(du)這些對試驗(yan)(yan)準備有(you)很(hen)好的(de)(de)(de)(de)(de)作(zuo)用。比如有(you)的(de)(de)(de)(de)(de)會(hui)要求將(jiang)試驗(yan)(yan)后(hou)樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)一(yi)塊寄發(fa)組織(zhi)單(dan)位,有(you)的(de)(de)(de)(de)(de)實驗(yan)(yan)室如果(guo)不仔細閱讀(du)的(de)(de)(de)(de)(de)話很(hen)容易(yi)將(jiang)測(ce)試后(hou)樣(yang)(yang)(yang)品(pin)(pin)立即處理掉,如果(guo)寄樣(yang)(yang)(yang)時(shi)再看見可就完了。

  4、測試前的(de)準備工作(zuo)一定要做好,包括設備的(de)校準、試運行等(deng),有條件的(de)情況下可以在正(zheng)式測試前選(xuan)擇一塊相仿(fang)的(de)樣(yang)(yang)品(pin)進行一下預測試,這(zhe)樣(yang)(yang)會將測試過程中的(de)問題(ti)提前發現提前解決。對正(zheng)式測試的(de)操作(zuo)有幫助。

  02、能力驗證樣品預處理

  1、樣品測(ce)試(shi)(shi)過程(cheng)中的(de)(de)判斷能力很重要,有時候我(wo)們在測(ce)試(shi)(shi)中往(wang)往(wang)會(hui)自以為是(shi),為了保證測(ce)試(shi)(shi)過程(cheng)中的(de)(de)準(zhun)確操作最好是(shi)找一個經驗豐(feng)富(fu)的(de)(de)作督察,發(fa)現問題及(ji)時解決(jue),如果等(deng)操作完畢(bi)再發(fa)現問題的(de)(de)話(hua)可能會(hui)因為樣品的(de)(de)消(xiao)耗而無法驗證結(jie)果;

  2、定量(liang)項(xiang)目,西林瓶內樣(yang)品不可(ke)分割,應全部用于檢測。一(yi)般參考書指導的(de)是加40mL稀釋液制成(cheng)40mL樣(yang)品。

  3、定(ding)量項(xiang)目樣品稀(xi)(xi)(xi)(xi)釋(shi)。指導書標明了稀(xi)(xi)(xi)(xi)釋(shi)范(fan)(fan)圍(wei)的(de),在(zai)稀(xi)(xi)(xi)(xi)釋(shi)范(fan)(fan)圍(wei)左(zuo)右各加(jia)1個(ge)稀(xi)(xi)(xi)(xi)釋(shi)度(du)進行(xing);書上沒有稀(xi)(xi)(xi)(xi)釋(shi)范(fan)(fan)圍(wei)的(de),多做稀(xi)(xi)(xi)(xi)釋(shi)倍數(shu),選擇合適(shi)的(de)稀(xi)(xi)(xi)(xi)釋(shi)倍數(shu)計數(shu)(一般可稀(xi)(xi)(xi)(xi)釋(shi)至10-8)。

  4、定量項(xiang)目,除了要(yao)多(duo)(duo)做稀釋(shi)倍數(shu)外(wai),同時(shi)同一稀釋(shi)度要(yao)多(duo)(duo)倒(dao)幾皿,從(cong)原(yuan)理上來(lai)講,檢(jian)(jian)測過程屬于隨機抽(chou)樣檢(jian)(jian)查,平(ping)(ping)板越多(duo)(duo),數(shu)據越接近(jin)真值。考慮性價比,又(you)不可(ke)能(neng)(neng)一直瘋狂一個稀釋(shi)度很(hen)多(duo)(duo)平(ping)(ping)板,所以能(neng)(neng)力驗證(zheng)時(shi)候(hou)多(duo)(duo)倒(dao)幾皿,求好結果。

  5、定性項目有一(yi)些重要(yao)步(bu)驟:

  a、增(zeng)菌(jun)及(ji)分離(li)步驟尤其重要。選擇(ze)合適(shi)的增(zeng)菌(jun)液(ye)和分離(li)用培(pei)養基(ji)對目標(biao)菌(jun)的檢出非常(chang)關鍵(jian),選擇(ze)兩種以(yi)上的增(zeng)菌(jun)液(ye)和分離(li)用培(pei)養基(ji)對菌(jun)株作(zuo)直接分離(li)和增(zeng)菌(jun)后分離(li)。

  b、劃線分(fen)離十(shi)分(fen)重要(yao),要(yao)把增菌(jun)液中的(de)(de)目(mu)標(biao)菌(jun)盡(jin)量多的(de)(de)表達出(chu)來,要(yao)分(fen)出(chu)單個菌(jun)落并盡(jin)可能多挑(tiao)取可疑(yi)菌(jun)落,確保分(fen)離到目(mu)標(biao)菌(jun)。

  c、生化試驗(yan)和血(xue)清學試驗(yan)以營(ying)養瓊脂平板上的純培(pei)養細菌(jun)為好(hao)。

  03、實驗(yan)過(guo)程一定要(yao)做陰陽(yang)對(dui)照

  陽性對(dui)照,是(shi)在試驗(yan)(yan)中,檢(jian)驗(yan)(yan)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)和培(pei)(pei)養(yang)條件(jian)是(shi)否(fou)適合,如果(guo)在實(shi)驗(yan)(yan)中,陽性實(shi)驗(yan)(yan)沒(mei)有生長(chang)的(de)話,那(nei)這(zhe)(zhe)個實(shi)驗(yan)(yan)是(shi)失敗的(de)。陰性對(dui)照主要是(shi)檢(jian)測(ce)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)是(shi)否(fou)污(wu)染,在沒(mei)有加(jia)入任何東西培(pei)(pei)養(yang)時,培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)培(pei)(pei)養(yang)后還是(shi)會顯示(shi)陽性結果(guo),這(zhe)(zhe)就說明培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)滅菌不(bu)徹(che)底,染菌了(le),這(zhe)(zhe)樣(yang)也會影響實(shi)驗(yan)(yan)結果(guo)的(de)。

  04、培養基方面需要注意地(di)方

  1、培養基配制充(chong)分混勻(yun)后(hou)再滅(mie)菌

  正(zheng)確做法是用一部(bu)分(fen)水(shui)攪拌均(jun)勻(yun)后,再加入剩余水(shui)量,混勻(yun)后滅菌或分(fen)裝(zhuang)。

  一定要用震(zhen)蕩器充分混勻(yun)(yun)水化液,作為檢測原(yuan)液,普通手(shou)搖混勻(yun)(yun)與經震(zhen)蕩器混勻(yun)(yun)的樣品液,計(ji)數結果(guo)相(xiang)差較大(da)。混勻(yun)(yun)后的樣品嚴格按照指導書規定的時(shi)間進行檢驗。

  2、混菌法(fa)倒皿要(yao)充分(fen)混勻

  培養基倒完要(yao)(yao)左5圈右5圈(混勻(yun)速度一(yi)定要(yao)(yao)慢,目的是——避免培養基波動到(dao)二皿接觸的縫(feng)隙部(bu)分(fen)造(zao)成后續污染),找較水(shui)平位(wei)置(zhi)冷卻凝固。

  3、培(pei)養基要(yao)不要(yao)覆蓋問題(ti)

  覆(fu)蓋(gai)的目的是為了阻(zu)止活菌(jun)在(zai)培養基表層通過(guo)鞭毛移動,造(zao)成片狀生(sheng)長(chang),無法計數(shu)這(zhe)一不(bu)利現(xian)象的發生(sheng)。這(zhe)里可(ke)以發揮主觀(guan)能(neng)動性-對于(yu)不(bu)運(yun)動的菌(jun),可(ke)以不(bu)覆(fu)蓋(gai),對于(yu)運(yun)動的菌(jun)覆(fu)蓋(gai)。

  總結一下圖片


  A、長(chang)(chang)期檢(jian)測同一(yi)種樣品,不覆蓋并無(wu)蔓(man)延現(xian)象,不覆蓋;長(chang)(chang)期檢(jian)測蔓(man)延選(xuan)擇了覆蓋,一(yi)直覆蓋。

  B、未知樣品,進行覆蓋(gai)和不覆蓋(gai)的比對實驗(yan),然后決定以后同樣的樣品是否需要覆蓋(gai)。養成經(jing)驗(yan)。

  C、能(neng)力驗(yan)(yan)(yan)證實(shi)(shi)驗(yan)(yan)(yan),覆蓋(gai)和(he)不覆蓋(gai)的都(dou)做,不要(yao)吝惜那么一點(dian)點(dian)培養基或耗材,畢竟能(neng)力驗(yan)(yan)(yan)證實(shi)(shi)驗(yan)(yan)(yan)做的漂(piao)亮才是實(shi)(shi)驗(yan)(yan)(yan)室(是室而不是人!)能(neng)力的綜合體現。

  4、 實驗(yan)培養過程勤觀察

  微生物培養過程一般需要(yao)(yao)幾小時到幾十小時,要(yao)(yao)利用這段時間觀察培養箱(xiang)及菌生長情(qing)況(kuang),比如溫度是否穩定,培養室內濕度如何(he)等(deng)等(deng),多(duo)思多(duo)看,準備預案。方有可能得到與盲(mang)樣一致的實驗結果。

  原始記(ji)(ji)錄(lu)應有條理、思路清(qing)晰(xi),完(wan)整準確地記(ji)(ji)錄(lu)菌株鑒定檢(jian)驗的全過程(cheng),原始記(ji)(ji)錄(lu)要(yao)(yao)包含檢(jian)測時間、檢(jian)測現象、檢(jian)測結果(guo)三個要(yao)(yao)素(su),方便檢(jian)測出現問題的溯源。

  05結果(guo)判斷

  結果的判定(ding)一般根據設備(bei)操作(zuo),但是對于人為操作(zuo)如(ru)評(ping)級、手工操作(zuo)等結果可能會(hui)(hui)因為人員的差別而會(hui)(hui)有不同的偏差,這(zhe)樣在判定(ding)時最(zui)好(hao)是找有經驗的部門負責人或質(zhi)量專家(jia)一塊定(ding)奪,這(zhe)樣的話會(hui)(hui)減(jian)少很多不必(bi)要(yao)的錯誤。


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