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檢測抗菌性能,這些測試方法及標準你必須知道

2016-08-01 作者: 瀏覽(lan)數:1207

近年來,國(guo)內抗菌行業的專家與學(xue)者的也做(zuo)了(le)大量(liang)探索,促進了(le)國(guo)內抗菌產業的發展,并制定了(le)相關(guan)的標準。如FZ/T 01021-1992 織物抗菌性(xing)能(neng)試驗方(fang)法、GB15975-1995 一次性(xing)使用衛(wei)(wei)生用品衛(wei)(wei)生標準及消毒技術規范等。

  檢測(ce)(ce)抗菌(jun)性能的(de)抗菌(jun)制品(pin)一(yi)般分(fen)為(wei)三大類型(xing):第(di)一(yi)種為(wei)抗菌(jun)紡織(zhi)(zhi)品(pin),第(di)二(er)種為(wei)抗菌(jun)塑料,第(di)三種為(wei)抗菌(jun)陶瓷(ci)。其中的(de)檢測(ce)(ce)方(fang)法中包括對細菌(jun)的(de)檢測(ce)(ce)和(he)(he)對霉菌(jun)的(de)檢測(ce)(ce)。一(yi)般抗菌(jun)制品(pin)的(de)測(ce)(ce)試方(fang)法分(fen)為(wei)定(ding)量(liang)試驗(yan)方(fang)法和(he)(he)定(ding)性試驗(yan)方(fang)法,也(ye)有的(de)分(fen)為(wei)適于(yu)(yu)溶(rong)出(chu)型(xing)和(he)(he)非溶(rong)出(chu)型(xing)抗菌(jun)劑的(de)檢測(ce)(ce),還有的(de)是按照菌(jun)液接種于(yu)(yu)織(zhi)(zhi)物上和(he)(he)織(zhi)(zhi)物置于(yu)(yu)一(yi)定(ding)濃(nong)度的(de)菌(jun)液中兩條思路來分(fen)類。

  抗(kang)(kang)菌標(biao)準(zhun)(zhun)及(ji)測(ce)試(shi)方法的(de)(de)(de)(de)合理性(xing)及(ji)正確(que)性(xing)對(dui)整個抗(kang)(kang)菌產(chan)(chan)業的(de)(de)(de)(de)發展起著(zhu)重要的(de)(de)(de)(de)作(zuo)用,包括測(ce)試(shi)方法設計(ji)的(de)(de)(de)(de)準(zhun)(zhun)確(que)性(xing)與(yu)科學性(xing),操作(zuo)誤(wu)差的(de)(de)(de)(de)合理控制,以及(ji)試(shi)驗本身所帶(dai)來的(de)(de)(de)(de)誤(wu)差大小等(deng)。隨著(zhu)國內(nei)外(wai)抗(kang)(kang)菌產(chan)(chan)業的(de)(de)(de)(de)興起和科技的(de)(de)(de)(de)進步,也促(cu)使抗(kang)(kang)菌標(biao)準(zhun)(zhun)與(yu)方法不斷完(wan)(wan)善。其中,國外(wai)抗(kang)(kang)菌產(chan)(chan)業的(de)(de)(de)(de)發展已經有(you)幾十(shi)年(nian)的(de)(de)(de)(de)歷史,所以較早就(jiu)提(ti)出了具有(you)代表性(xing)和穩定性(xing)的(de)(de)(de)(de)抗(kang)(kang)菌測(ce)試(shi)方法,近年(nian)來又(you)作(zuo)了修改與(yu)完(wan)(wan)善。

  用于抗菌紡(fang)織品的測試方(fang)法如下:

  1、奎因試驗法(QUINN TEST)

  該方法(fa)(fa)是QUINN創立的(de)(de)(de)織(zhi)(zhi)物(wu)抗菌(jun)(jun)性能(neng)測(ce)(ce)試方法(fa)(fa),發表在(zai)<>{14(1),1-7,1966. 14(2),183-188,1966}。該方法(fa)(fa)的(de)(de)(de)基(ji)本原理是將試驗菌(jun)(jun)液接種于(yu)織(zhi)(zhi)物(wu)上,再覆蓋以半固體瓊脂培養基(ji),在(zai)一定條件(jian)下培養一段時間后,觀察(cha)織(zhi)(zhi)物(wu)上的(de)(de)(de)菌(jun)(jun)落數(shu),計算出抑菌(jun)(jun)率(lv)。該方法(fa)(fa)也是世界上第一部測(ce)(ce)試織(zhi)(zhi)物(wu)抗菌(jun)(jun)能(neng)力的(de)(de)(de)定量(liang)測(ce)(ce)試方法(fa)(fa),簡(jian)潔方便(bian),應用廣(guang)泛。

  2、平行畫線法(條紋法)

  此種測試(shi)方(fang)法(fa)為(wei)簡易、快速的(de)定性試(shi)驗(yan)方(fang)法(fa),適用于(yu)(yu)耐水洗(xi)和耐干洗(xi)的(de)抗菌整理(li)織(zhi)物的(de)抗菌特性測試(shi),其原理(li)為(wei):通過劃平行線的(de)方(fang)法(fa)將菌液(ye)接種于(yu)(yu)瓊脂(zhi)培養基上,將樣品貼于(yu)(yu)瓊脂(zhi)表面(mian)上,在(zai)一(yi)定條件下培養一(yi)段時間后(hou),檢查瓊脂(zhi)表面(mian)沿劃線部位由于(yu)(yu)細菌繁殖中斷而出現的(de)清潔區,為(wei)抗菌活性的(de)大小劃分等級,評價(jia)織(zhi)物抗菌能力(li)的(de)大小。

  3、改(gai)良(liang)的奎(kui)因試(shi)驗法

  著(zhu)名的(de)(de)青島醫(yi)(yi)學(xue)院微(wei)生物學(xue)專家鄒承淑教授(筆者的(de)(de)重要合(he)作(zuo)伙伴)在八十年代(dai)初開(kai)始改(gai)進(jin)QUINN TEST,之后經(jing)過國內醫(yi)(yi)學(xue)界共(gong)同努力完成了(le)中國版的(de)(de)QUINN TEST--改(gai)良的(de)(de)奎(kui)因(yin)(yin)試(shi)(shi)(shi)驗(yan)法(fa)。本方(fang)法(fa)是在奎(kui)因(yin)(yin)試(shi)(shi)(shi)驗(yan)法(fa)的(de)(de)基(ji)礎上作(zuo)了(le)修改(gai),原理也是將試(shi)(shi)(shi)驗(yan)菌(jun)液接種于織物上,覆蓋(gai)以(yi)培(pei)養(yang)(yang)基(ji),經(jing)一(yi)定(ding)時間培(pei)養(yang)(yang)后,觀(guan)察計數(shu)抗(kang)(kang)菌(jun)和未抗(kang)(kang)菌(jun)織物上的(de)(de)菌(jun)落數(shu),計算抗(kang)(kang)菌(jun)率的(de)(de)大小,定(ding)量測試(shi)(shi)(shi)抗(kang)(kang)菌(jun)織物的(de)(de)抗(kang)(kang)菌(jun)性(xing)能。本方(fang)法(fa)是一(yi)種簡(jian)便(bian)、快(kuai)速、重現性(xing)好的(de)(de)定(ding)量試(shi)(shi)(shi)驗(yan)方(fang)法(fa),對于原始的(de)(de)奎(kui)因(yin)(yin)試(shi)(shi)(shi)驗(yan)法(fa)相比,具有以(yi)下(xia)優(you)點:

  ①一(yi)次能(neng)測(ce)試幾種不同織物對同一(yi)種細菌的抗菌性能(neng),提高了測(ce)試效率,節(jie)省(sheng)時間。

  ②接種菌(jun)液濃度(du)小(6000個/ml),營養充足,菌(jun)落變大,易用肉眼來直接觀察菌(jun)落的生(sheng)長,避免用顯(xian)微鏡觀察造成污染。

  ③稀釋菌液用生理(li)鹽水代替肉湯,避免稀釋過程中(zhong)細菌增(zeng)長,影響試驗準確(que)性。

  ④省(sheng)略了織物(wu)加(jia)菌(jun)液(ye)后,在一定(ding)的(de)相對濕(shi)度(du)下干燥的(de)過(guo)程(cheng),簡化了實驗步(bu)驟,也避免(mian)了干燥過(guo)程(cheng)中因溫度(du)掌握不準而(er)使細菌(jun)死亡(wang)的(de)弊病(bing)。

  但本方(fang)法中也存在一(yi)些不足(zu)之處:

  ④本方(fang)(fang)法在(zai)覆(fu)蓋瓊脂培養基步驟(zou)中(zhong)(zhong),為(wei)避免培養基溢出樣(yang)品(pin)外(wai),將加菌(jun)液后的(de)樣(yang)品(pin)平皿(min)放入冰箱內15min,其中(zhong)(zhong)沒有(you)規定具(ju)體的(de)溫度,不(bu)(bu)適合(he)的(de)溫度會造成細菌(jun)的(de)死(si)亡或增(zeng)長(chang),一般在(zai)5-10℃能(neng)保證細菌(jun)不(bu)(bu)會死(si)亡且不(bu)(bu)會增(zeng)長(chang),但(dan)本方(fang)(fang)法中(zhong)(zhong)沒有(you)規定,在(zai)樣(yang)品(pin)的(de)挪動過程中(zhong)(zhong)從而會影響試(shi)驗結果。

  4、抑菌環試驗法(暈圈法)

  將試(shi)驗菌(jun)接種于瓊脂(zhi)培養(yang)基平板表面,再貼放上試(shi)驗樣(yang)品,由于抑(yi)菌(jun)劑(ji)不斷溶解(jie)以(yi)致在瓊脂(zhi)中擴散形成抑(yi)菌(jun)環(huan),通過測量抑(yi)菌(jun)環(huan)的寬(kuan)度來(lai)評價抗(kang)菌(jun)能力的大小。

  5、AATCC-100試(shi)驗法(fa)

  此種測(ce)試方(fang)法(fa)為美(mei)國(guo)AATCC委(wei)員會提出(chu)的(de)(de)一(yi)(yi)種定(ding)量測(ce)試方(fang)法(fa),用于檢測(ce)織(zhi)物(wu)的(de)(de)殺(sha)菌(jun)(jun)能(neng)力和(he)抑菌(jun)(jun)能(neng)力,是目前國(guo)外(wai)比較著名的(de)(de)抗菌(jun)(jun)性(xing)能(neng)測(ce)試方(fang)法(fa),也是后(hou)來國(guo)內外(wai)一(yi)(yi)些(xie)新(xin)方(fang)法(fa)的(de)(de)起源(yuan)。此方(fang)法(fa)的(de)(de)原理為:織(zhi)物(wu)對(dui)照(zhao)樣(yang)與試樣(yang)經細菌(jun)(jun)接種并在一(yi)(yi)定(ding)條件下(xia)培(pei)養(yang)(yang)后(hou),加(jia)入中(zhong)和(he)液來洗脫(tuo)細菌(jun)(jun),且用稀釋(shi)平(ping)板法(fa)測(ce)定(ding)洗脫(tuo)液中(zhong)的(de)(de)菌(jun)(jun)液濃(nong)度(du),進行(xing)活菌(jun)(jun)培(pei)養(yang)(yang)計(ji)數(shu),得(de)到抗菌(jun)(jun)織(zhi)物(wu)的(de)(de)細菌(jun)(jun)減少百(bai)分率,評價該織(zhi)物(wu)抗菌(jun)(jun)殺(sha)菌(jun)(jun)性(xing)能(neng)。

  6、JIS L 1902 2002試(shi)驗方法

  本(ben)標準是在JIS L 1902 1998試(shi)驗(yan)(yan)(yan)(yan)方法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)的基(ji)礎上又進(jin)一(yi)(yi)步修改而成(cheng)的試(shi)驗(yan)(yan)(yan)(yan)方法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa),本(ben)方法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)也是介紹(shao)了兩種試(shi)驗(yan)(yan)(yan)(yan)方法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa),定(ding)(ding)(ding)性試(shi)驗(yan)(yan)(yan)(yan)方法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)和定(ding)(ding)(ding)量試(shi)驗(yan)(yan)(yan)(yan)方法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa),但是定(ding)(ding)(ding)量試(shi)驗(yan)(yan)(yan)(yan)方法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)介紹(shao)了兩種,分別為菌(jun)液吸(xi)收法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)和細(xi)(xi)菌(jun)接種法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa),其(qi)定(ding)(ding)(ding)性方法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)(抑(yi)菌(jun)環法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa))和菌(jun)液吸(xi)收法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)同(tong)JIS L 1902 1998標準中原理及方法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)基(ji)本(ben)相同(tong),其(qi)細(xi)(xi)菌(jun)接種法(fa)(fa)(fa)(fa)(fa)原理是將細(xi)(xi)菌(jun)在加(jia)壓條件下(xia)接種至調濕(shi)過的試(shi)驗(yan)(yan)(yan)(yan)片(pian)上,然(ran)后在一(yi)(yi)定(ding)(ding)(ding)濕(shi)度下(xia)培養一(yi)(yi)段時(shi)間,再對樣品進(jin)行洗脫(tuo),活菌(jun)計(ji)數,得細(xi)(xi)菌(jun)減少值(zhi)。

  本(ben)方法對不同試驗(yan)目的(de)和用途及織物(wu)不同處(chu)理應用的(de)試驗(yan)細(xi)菌(jun)作了詳細(xi)的(de)規定(ding),并且介紹(shao)了菌(jun)液吸收法用于測定(ding)織物(wu)滅菌(jun)活性值,用細(xi)菌(jun)接種法,計(ji)算(suan)細(xi)菌(jun)減(jian)少(shao)值。

  7、JIS Z 2911抗(kang)霉菌試驗(yan)法

  本(ben)方(fang)法(fa)是針對于霉菌而制定(ding)的一種測試方(fang)法(fa),其基(ji)本(ben)原理為:在(zai)樣品及培養基(ji)上(shang)均勻(yun)地噴灑(sa)一定(ding)量的混(hun)合孢子懸(xuan)液(ye),培養一定(ding)時間后(hou),觀察試樣上(shang)的長霉情況,對抗霉菌性能(neng)進行分等級定(ding)性評價。

  8、振蕩燒瓶法(fa)

  振蕩燒瓶法是模仿(fang)人體的穿著條(tiao)件(jian),使細(xi)菌(jun)在振蕩條(tiao)件(jian)(300r/min)下與織(zhi)物(wu)內抗菌(jun)劑接觸,振蕩1-6h之后,經細(xi)菌(jun)培(pei)養計數,計算細(xi)菌(jun)減少百(bai)分率,從而確定抗菌(jun)性能大小。

  應(ying)用此測(ce)試方(fang)法時(shi),被測(ce)試樣不受紡織(zhi)品形狀的限(xian)制,本(ben)方(fang)法不僅(jin)適用于(yu)一般的紡織(zhi)織(zhi)物(wu)(wu),而且(qie)還適用于(yu)凹凸不平(ping)的織(zhi)物(wu)(wu)、有毛(mao)或羽的織(zhi)物(wu)(wu)和(he)粉末狀織(zhi)物(wu)(wu)等,其使(shi)用范圍(wei)廣(guang)泛。而且(qie)還可適用于(yu)抗(kang)菌塑料、抗(kang)菌瓷磚等抗(kang)菌制品。塑料等拒水性材料應(ying)先(xian)將其制成微粒再進行試驗。

  9、FZ/T 01021-92試驗方法

  此(ci)方(fang)法是國(guo)內根據美國(guo)的(de)AATCC100-1981制定(ding)的(de)紡織(zhi)(zhi)行業標(biao)準,是測試抗菌(jun)(jun)(jun)性能的(de)一種(zhong)(zhong)定(ding)量測試方(fang)法。其基本原理為:將試驗菌(jun)(jun)(jun)接(jie)種(zhong)(zhong)于織(zhi)(zhi)物(對照樣(yang)和試樣(yang))上,經“0”接(jie)觸(chu)時(shi)間(jian)培(pei)養和一定(ding)時(shi)間(jian)培(pei)養后(hou),對樣(yang)品進行洗脫(tuo),然后(hou)對其洗脫(tuo)液進行活菌(jun)(jun)(jun)計(ji)(ji)數(shu),計(ji)(ji)算(suan)出試樣(yang)的(de)細菌(jun)(jun)(jun)減(jian)(jian)少(shao)百分率。本方(fang)法對活菌(jun)(jun)(jun)培(pei)養計(ji)(ji)數(shu)中(zhong)平(ping)皿菌(jun)(jun)(jun)落(luo)數(shu)的(de)測定(ding)作(zuo)了非(fei)常細致的(de)規(gui)定(ding),但是,本標(biao)準中(zhong)一定(ding)時(shi)間(jian)培(pei)養后(hou)用(yong)100ml緩沖液洗脫(tuo),劇(ju)烈(lie)搖晃(huang)1min,此(ci)工藝還有待于探討,因為劇(ju)烈(lie)搖晃(huang)有可能會造成細菌(jun)(jun)(jun)的(de)增長或減(jian)(jian)少(shao),就會影(ying)響試驗結果。

  10、JIS L 1902 1998 試驗(yan)方(fang)法

  此方(fang)(fang)法(fa)(fa)(fa)為日本(ben)的(de)工(gong)業標準,規定(ding)了定(ding)性(xing)試(shi)(shi)(shi)驗(yan)方(fang)(fang)法(fa)(fa)(fa)(暈圈(quan)法(fa)(fa)(fa))和(he)(he)定(ding)量試(shi)(shi)(shi)驗(yan)方(fang)(fang)法(fa)(fa)(fa)(浸(jin)漬法(fa)(fa)(fa))。其中(zhong)(zhong)定(ding)性(xing)試(shi)(shi)(shi)驗(yan)方(fang)(fang)法(fa)(fa)(fa)只可(ke)測試(shi)(shi)(shi)出(chu)是否(fou)具有(you)(you)抗(kang)菌性(xing)能(neng),而不能(neng)準確測定(ding)出(chu)抗(kang)菌率。但此方(fang)(fang)法(fa)(fa)(fa)非(fei)(fei)常簡(jian)便,易于(yu)操(cao)作。其原理為將(jiang)試(shi)(shi)(shi)樣(yang)放于(yu)平板培(pei)(pei)養基中(zhong)(zhong)心,經一段時間(jian)培(pei)(pei)養后,觀察樣(yang)品(pin)周圍產生的(de)抑菌環,計算抑菌環寬(kuan)度(du),評價(jia)試(shi)(shi)(shi)樣(yang)是否(fou)具有(you)(you)抗(kang)菌能(neng)力(li)。同時,其試(shi)(shi)(shi)驗(yan)有(you)(you)效(xiao)性(xing)的(de)判定(ding)也非(fei)(fei)常簡(jian)便,觀察未(wei)處理樣(yang)品(pin)經培(pei)(pei)養后有(you)(you)沒有(you)(you)出(chu)現細(xi)菌增值即可(ke)。本(ben)方(fang)(fang)法(fa)(fa)(fa)中(zhong)(zhong)還對試(shi)(shi)(shi)樣(yang)的(de)要求作了非(fei)(fei)常細(xi)致的(de)規定(ding),包括織物、紗(sha)線(xian)、軟填(tian)料和(he)(he)長絨毛等。

  定量試驗方法(浸漬法)原理也是通過對(dui)試樣(yang)接種細(xi)菌與(yu)培養(yang),對(dui)“0”時(shi)間接觸培養(yang)和(he)一定時(shi)間培養(yang)后進行活菌計(ji)數,計(ji)算出抑菌活性值(zhi)和(he)殺菌活性值(zhi)。本方法特點為:

  ①不同于其(qi)它方法中(zhong)通過比(bi)濁(zhuo)管比(bi)濁(zhuo)來粗測(ce)菌(jun)液濃度(du)的方法,而是(shi)用分(fen)光光度(du)計測(ce)定(ding)其(qi)吸收(shou)率來確(que)定(ding)菌(jun)液濃度(du),提高了試驗的準確(que)度(du)。

  ②用冷(leng)凍(dong)的生(sheng)理鹽(yan)水(0.85%)來洗脫培養(yang)后樣品(pin),避免細菌在(zai)洗脫過程中增長(chang)或減少(shao),保證(zheng)所需測定細菌數的準確性,減少(shao)試驗(yan)誤差。

  ③在計算結果(guo)(guo)時(shi),應(ying)用抑菌(jun)活(huo)性值(zhi)(zhi)和(he)(he)殺菌(jun)活(huo)性值(zhi)(zhi)比較全面的(de)來表(biao)現試樣(yang)的(de)抑菌(jun)和(he)(he)殺菌(jun)能力,而(er)且應(ying)用對數(shu)值(zhi)(zhi)來體現試驗結果(guo)(guo)。

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