分享|理化實驗室常見注意事項

2021-12-31 作(zuo)者：瀏覽(lan)數：1302

　　上班(ban)前

　　1. 開門(men)注(zhu)意通風，檢查(cha)門(men)窗、空調設備、其它(ta)電器設備等是否正常。

　　2. 用水注意先(xian)把水龍(long)頭的水擰開一段時(shi)間。

　　3. 看看今天是否要(yao)用(yong)烘箱，確定即(ji)打開，注意升溫情況。

　　上班過程

　　1. 烘箱、電爐、馬弗爐、高壓鍋等不用(yong)時(shi)(shi)需及時(shi)(shi)關掉(diao)，無(wu)人看守時(shi)(shi)也必須關掉(diao)。

　　2. 經常收拾桌面(mian)，清(qing)理用過的用具、玻璃儀器等。

　　3. 經常檢(jian)查試(shi)劑(ji)配制使(shi)用情況，是否有過期試(shi)劑(ji)、標(biao)準液等。

　　4. 對(dui)于架上試(shi)劑瓶經常拭擦以保持干凈無(wu)灰塵。

　　5. 原(yuan)始(shi)記錄(lu)必須是實(shi)(shi)驗過程中的(de)實(shi)(shi)際數據，不能隨意涂(tu)改，如果(guo)對結果(guo)有(you)懷(huai)疑(yi)，也不能劃去或撕毀，而在備注注明情況，重新做試(shi)驗并記錄(lu)，直到結果(guo)滿意。

　　6. 原(yuan)始記錄是應統一表格(ge)，歸(gui)檔(dang)保存，按每月整理(li)收藏，(不常有的原(yuan)始記錄酌(zhuo)情(qing)處(chu)理(li))。

　　7. 儀(yi)(yi)器(qi)(qi)用(yong)具(ju)(ju)分(fen)類擺放，用(yong)過的儀(yi)(yi)器(qi)(qi)用(yong)具(ju)(ju)即時清(qing)洗干凈，自然晾干(或烘(hong)干)，置于指(zhi)定位置存放，以備后用(yong)(注意盡量(liang)不要用(yong)前(qian)匆匆忙忙清(qing)洗儀(yi)(yi)器(qi)(qi)用(yong)具(ju)(ju))。

　　下班

　　1. 確認(ren)未完成(cheng)試(shi)驗(yan)樣品及儀器的安全性。

　　2. 關閉所有(you)電源，培(pei)養箱(xiang)、冰(bing)箱(xiang)除外。

　　3. 確認關好水龍頭。

　　4. 確認(ren)關好所有門窗。

　　標(biao)準(zhun)液標(biao)定注意事(shi)項

　　1. 各種基準物(wu)質烘干的溫度要求并不(bu)一樣。

　　2. 烘(hong)干過程，稱量瓶的(de)蓋(gai)(gai)子應置于稱量瓶上(shang)，傾斜一定(ding)角度使半蓋(gai)(gai)狀態，不要把蓋(gai)(gai)另(ling)置于烘(hong)箱板上(shang)，這(zhe)是為了防(fang)止有異物從烘(hong)箱頂部跌落到樣(yang)品(pin)中，也防(fang)止把烘(hong)箱板上(shang)的(de)異物帶入樣(yang)品(pin)中。

　　3. 樣(yang)品應置于溫度計探頭附近。

　　4. 烘好(hao)后，把干(gan)燥器(qi)移(yi)到烘箱邊，用(yong)夾子等圈(quan)住稱(cheng)量瓶，以最短的時間(jian)把稱(cheng)量瓶移(yi)入干(gan)燥器(qi)中，蓋好(hao)干(gan)燥器(qi)，半個(ge)小時內，小心移(yi)開(kai)干(gan)燥器(qi)蓋少許，以放出部分熱空氣(qi)。

　　5. 樣品(pin)冷卻后則(ze)要稱量，不能待太長時間。

　　6. 稱量(liang)(liang)時始終一個原則，不(bu)要讓稱量(liang)(liang)瓶吸附到水氣、污跡或其(qi)它異物，所(suo)以直接(jie)用手接(jie)觸(chu)稱量(liang)(liang)瓶、用藥匙取樣品、開著天平門稱量(liang)(liang)甚至呼吸氣吹到稱量(liang)(liang)瓶都是不(bu)正(zheng)確的操作(zuo)。

　　7. 正確的(de)(de)稱(cheng)量(liang)(liang)操(cao)作應是減量(liang)(liang)法稱(cheng)量(liang)(liang)，為(wei)什么呢，因為(wei)減量(liang)(liang)法稱(cheng)量(liang)(liang)，稱(cheng)的(de)(de)是烘好的(de)(de)樣品(pin)，確保樣品(pin)大部分時(shi)間在天平(ping)的(de)(de)干燥(zao)環境中(zhong)。

　　8. 如果增量法稱(cheng)量，則要確保器(qi)皿(min)干燥且(qie)外表也須干凈，由(you)于是在天(tian)(tian)平中(zhong)操(cao)作(zuo)，所(suo)以(yi)不能(neng)碰到器(qi)皿(min)以(yi)引起(qi)(qi)天(tian)(tian)平讀數異常，所(suo)以(yi)操(cao)作(zuo)起(qi)(qi)來會麻(ma)煩很多。

　　9. 稱(cheng)(cheng)量(liang)(liang)過程(cheng)中，只能(neng)用稱(cheng)(cheng)量(liang)(liang)瓶(ping)蓋輕輕敲(qiao)打稱(cheng)(cheng)量(liang)(liang)瓶(ping)邊緣，使藥品(pin)均勻(yun)落到待測(ce)器皿(min)中，敲(qiao)藥時(shi)間盡量(liang)(liang)的(de)短，這要求(qiu)較熟(shu)練的(de)操(cao)作。

　　10. 盡(jin)可(ke)能的多稱幾(ji)個(ge)樣品，結(jie)果取最可(ke)能的數(shu)值，舍棄較大(da)和較小(xiao)的數(shu)值。

　　關鍵：烘干、冷卻、稱量

　　還原糖測定注意事項

　　1. 堿(jian)性酒石酸甲、乙(yi)液與還原(yuan)糖反應是定(ding)(ding)量關系，它(ta)們的多(duo)少(shao)直接影響測定(ding)(ding)結果的多(duo)少(shao)，從而影響檢測數(shu)據(ju)，所(suo)以堿(jian)性酒石酸甲、乙(yi)液必須精確吸取，保證(zheng)每次取樣量一致。

　　影響堿性酒石酸甲、乙液(ye)吸取誤差的因素：

　　(1)堿性(xing)酒石(shi)酸(suan)甲、乙液(ye)在吸管中刻度(du)液(ye)面(mian)的位置要(yao)保持一致。

　　(2)吸管外壁殘留的(de)液體(ti)多少會造成堿(jian)性(xing)酒(jiu)石酸甲(jia)、乙(yi)液

　　取(qu)樣(yang)量的(de)誤差，所以要習慣(guan)性(xing)的(de)對吸管外(wai)壁(bi)(bi)的(de)堿性(xing)酒(jiu)石酸甲、乙液(ye)進行相同處理(li)，保證每次外(wai)壁(bi)(bi)殘留液(ye)相對一致，從(cong)而(er)減少液(ye)體取(qu)樣(yang)量的(de)誤差。

　　(3)堿性酒石酸(suan)甲、乙(yi)液放入三角瓶的(de)速度保持一致(zhi)(不可吹(chui))，放完后(hou)要觀察其殘留在吸管(guan)中(zhong)有多少，要保證每次(ci)殘留一致(zhi)。

　　(4)堿(jian)(jian)性(xing)酒石酸甲(jia)(jia)、乙液(ye)的(de)不是(shi)很明顯的(de)沉(chen)淀(或(huo)濃度變化)也(ye)會對測(ce)(ce)定造成(cheng)波動，取堿(jian)(jian)性(xing)酒石酸甲(jia)(jia)液(ye)的(de)器(qi)(qi)具(ju)切記不要與堿(jian)(jian)性(xing)物質接觸(同時(shi)也(ye)要注意防止帶入堿(jian)(jian)性(xing)物質于(yu)甲(jia)(jia)液(ye)中)，以避免甲(jia)(jia)液(ye)產生沉(chen)淀，盛甲(jia)(jia)液(ye)的(de)容器(qi)(qi)時(shi)間長了，內壁上(shang)也(ye)會殘(can)留固體(硫酸銅)，這(zhe)些固體顆粒也(ye)會造成(cheng)檢測(ce)(ce)誤差(cha)。

　　2. 滴定速(su)(su)度(du)要保持(chi)均衡一(yi)致，趁熱以每2秒一(yi)滴的(de)速(su)(su)度(du)滴定為好(速(su)(su)度(du)不要受滴定時間的(de)長(chang)短而(er)改變(bian))。

　　3. 試樣溶液滴定(ding)時(shi)要進行預(yu)測，正式測定(ding)時(shi)從滴定(ding)管滴加比預(yu)測體積少1mL的試樣溶液至(zhi)錐形瓶中(zhong)，控制在2min中(zhong)內加熱至(zhi)沸，保持(chi)沸騰以1滴/2s的速度滴定(ding)至(zhi)終點。

　　4. 電爐(lu)的溫度對(dui)檢測(ce)結果(guo)也有影(ying)響(xiang)，所以(yi)要保證電爐(lu)充分預熱(re)，同時三(san)角瓶在(zai)電爐(lu)上的放置位置要保持一致。

　　5. 測定時(shi)液(ye)體沸騰后的開始(shi)滴定的時(shi)間(jian)也要保持一致(zhi)2min內，一般等(deng)液(ye)體充分沸騰后開始(shi)滴定。

　　6. 滴定終(zhong)點的判斷也要保持一(yi)致。等液體(ti)藍色剛好(hao)褪去為為滴定終(zhong)點。

　　7. 糖液稀釋及取樣也要注意精確，注意吸管正確使(shi)用方法。

　　8. 折光糖(tang)度精(jing)心檢測，依此數據輔導還(huan)原糖(tang)的檢測。

　　9. 注(zhu)意(yi)輸液(ye)膠管漏液(ye)、變(bian)形，滴定管尖端氣泡等對檢測數值的(de)影響。

　　10. 三(san)角瓶使(shi)用后清(qing)洗(xi)干凈(jing)。有時無法準確(que)找到滴定終點(dian)就是由于三(san)角瓶未清(qing)洗(xi)干凈(jing)引起的。

　　關鍵：吸取堿性酒石酸、甲乙液沸(fei)騰并維持沸(fei)騰2mins、整個(ge)滴定(ding)過程須(xu)控(kong)制在2mins內完成。

　　凱氏定氮(dan)蛋白質測定注(zhu)意事項

　　1. 原則上樣品越(yue)少(shao)，越(yue)容易消化，但樣品越(yue)少(shao)，計量的(de)誤差可(ke)能性也越(yue)大(da)，所以控制(zhi)到蛋白質(zhi)含(han)量為0.10g左右，加(jia)入(ru)0.4g硫(liu)酸(suan)銅、6g硫(liu)酸(suan)鉀及20mL濃硫(liu)酸(suan)應是比較合理的(de)消化方(fang)法。

　　2. 變色時(shi)因為是(shi)緩慢變色，所以可以兩種方法(fa)計時(shi)，一是(shi)完全變色后(hou)半小(xiao)時(shi)即停止(zhi)消化(hua)，二是(shi)剛變色后(hou)一個小(xiao)時(shi)停止(zhi)消化(hua)。

　　3. 消化液(ye)(ye)完全冷卻后才能加水、轉移、定(ding)(ding)容，這三個步驟都會導致發(fa)熱，所以必須確保(bao)水溶液(ye)(ye)最后在定(ding)(ding)容到刻度時冷卻到室溫，當然要多次洗滌凱氏燒瓶(即凱氏定(ding)(ding)氮瓶)以確保(bao)轉移完全。

　　4. 消(xiao)化液(ye)最(zui)好不要放(fang)置過液(ye)，需要過夜(ye)測定(ding)(ding)時(shi)，請先轉移定(ding)(ding)容好消(xiao)化液(ye)。定(ding)(ding)容好的消(xiao)化液(ye)也(ye)不能放(fang)置時(shi)間太久(如幾天)才進行蒸餾滴(di)定(ding)(ding)。

　　5. 蒸(zheng)餾時，加樣液過(guo)程可以(yi)(yi)從容操作，但是加堿后(hou)，必(bi)須緊密有序，堿的(de)流入(ru)過(guo)程應是充滿整(zheng)個漏(lou)(lou)斗(dou)(dou)口(kou)的(de)，在堿還(huan)沒有放(fang)完時就應準備好加水(shui)以(yi)(yi)封住漏(lou)(lou)斗(dou)(dou)口(kou)，確保蒸(zheng)發器中已有氨從漏(lou)(lou)斗(dou)(dou)口(kou)泄漏(lou)(lou)，而(er)導(dao)致結(jie)果偏低。

　　6. 加(jia)入(ru)的(de)氫氧化(hua)(hua)(hua)(hua)鈉溶液(ye)除與硫(liu)酸(suan)銨作(zuo)用外，還(huan)與消化(hua)(hua)(hua)(hua)液(ye)中的(de)硫(liu)酸(suan)和(he)硫(liu)酸(suan)銅作(zuo)用，若加(jia)入(ru)的(de)氫氧化(hua)(hua)(hua)(hua)鈉不(bu)夠，則溶液(ye)呈(cheng)藍色(se)，不(bu)生成(cheng)褐色(se)的(de)氫氧化(hua)(hua)(hua)(hua)銅沉淀。所以，加(jia)入(ru)的(de)氫氧化(hua)(hua)(hua)(hua)鈉必須過量，并且動作(zuo)還(huan)要迅速(su)，以防止(zhi)氨的(de)流失。

　　7. 停止(zhi)蒸餾時(shi)(shi)，由于反應(ying)室外層(ceng)的(de)(de)壓(ya)力突然降低，可使液(ye)體(ti)倒(dao)吸入反應(ying)室外層(ceng)，所以，操作時(shi)(shi)，應(ying)先將冷凝(ning)(ning)管下端提高液(ye)面并清洗管口，再蒸一分鐘后關掉熱源。蒸餾是否完全(quan)，可用精密pH試紙測冷凝(ning)(ning)管口的(de)(de)冷凝(ning)(ning)液(ye)來測定，中(zhong)性則(ze)說明(ming)已蒸餾完全(quan)。

　　關(guan)鍵：樣(yang)品稱量入凱氏燒瓶(ping)、加堿(jian)

　　附：做蛋白質試驗化驗室的常見問題：

　　1. 沒有用(yong)長條紙稱量。

　　2. 不知道(dao)樣品精確(que)度是多少，用何種天平稱(cheng)量;

　　3. 直接(jie)從原試劑瓶中取藥稱量。

　　4. 凱氏(shi)燒瓶角度不對(應45-60度之間)。

　　5. 不固定(ding)凱氏(shi)燒瓶就(jiu)進(jin)行消化(hua)，就(jiu)是隨便掛上去，太(tai)危(wei)險。

　　6. 消化溫度(du)不知如(ru)何控制(zhi)，什么時候(hou)該小(xiao)火，小(xiao)到多少，什么時候(hou)該大火擔心不加石棉(mian)網會使凱氏燒瓶破裂。

　　7. 不(bu)知如何把握凱氏燒瓶(ping)以振(zhen)搖消(xiao)化液(ye)，也沒(mei)有(you)準備厚(hou)手套。

　　8. 不知道過夜保存(cun)的應是消(xiao)化(hua)液而不是定容液(消(xiao)化(hua)液定容后應及時蒸餾(liu))。

　　9. 第二天(tian)發現定容液液面低于刻度時又加水(shui)到刻度。

　　10. 標(biao)定基準物沒有烘到要求(qiu)溫度。