2015年10月18日(ri)第四屆全國激(ji)光共聚焦(jiao)顯微技術理論與應用學術交流研討會圓滿(man)閉幕。

　　在14日下午的(de)(de)會議中，有一個特邀報告格外地引起了筆者(zhe)的(de)(de)注意，來自(zi)西北農林科技大學(xue)動物(wu)醫(yi)學(xue)院的(de)(de)趙善廷教授提到他(ta)曾與高壓冷凍固(gu)定技術(shu)的(de)(de)發明者(zhe)瑞(rui)士(shi)科學(xue)家Studer博士(shi)合作，將(jiang)該技術(shu)與器官型腦片培養(yang)技術(shu)(organotypic slice culture)相結合，成(cheng)功(gong)地研究了與學(xue)習和記憶密切有關的(de)(de)長時(shi)程效(xiao)應(long-term potentiation, LTP)對突觸(chu)的(de)(de)影響。

西北農林科技大學動物醫學院的趙善廷教授

　　據了(le)解，以往(wang)的常規電(dian)鏡技術(shu)需要先用甲醛(quan)、戊二醛(quan)等化學試劑對樣(yang)品進行化學固(gu)(gu)定，但(dan)這種固(gu)(gu)定方(fang)法有(you)三個缺點包(bao)括(kuo)：

　　一、無法撲捉(zhuo)短暫生理過(guo)程的形態變化(hua)(hua)和(he)特(te)征，如(ru)神經(jing)元突(tu)觸小泡內神經(jing)遞質的釋放(fang)；二、脫(tuo)水過(guo)程用酒精等(deng)有機溶(rong)劑(ji)會(hui)造成細胞和(he)組織皺縮，使其(qi)形態和(he)大(da)小發生改(gai)變；三、化(hua)(hua)學(xue)固定劑(ji)特(te)別是戊二醛(quan)可引起蛋白質變性，使其(qi)與相(xiang)應抗體(ti)結合(he)能力下降甚至(zhi)喪(sang)失(shi)，導致電鏡免疫組化(hua)(hua)染色失(shi)敗。

　　為克服化學固(gu)定(ding)的這些缺(que)點，上世紀九十年代(dai)末，瑞士(shi)(shi)科學家Studer博(bo)士(shi)(shi)發明了一種新的物理(li)性電鏡固(gu)定(ding)技術，即(ji)高壓(ya)冷凍電鏡固(gu)定(ding)技術，該技術可以(yi)在不使用任何化學固(gu)定(ding)劑的條件(jian)下五十毫秒以(yi)內將組織(zhi)和(he)細胞完全固(gu)定(ding)。

　　雖然(ran)高壓(ya)冷凍技術克服了(le)化(hua)學(xue)固定(ding)的(de)三(san)大缺(que)點(dian)，但它(ta)本身(shen)也有一個不(bu)足之處：固定(ding)的(de)樣品非常小，直徑不(bu)能(neng)超過1mm，厚度不(bu)能(neng)超過μm，從而限(xian)制了(le)它(ta)在神經生物學(xue)研究中(zhong)的(de)應用。

　　為了克服高壓冷凍(dong)固(gu)定技(ji)(ji)術的缺點，將其應(ying)用到(dao)(dao)神經生物學研(yan)究中，2002年，該技(ji)(ji)術發(fa)明者Studer博士與(yu)當時正在(zai)德國弗萊堡大學醫學院做博士后(hou)的趙(zhao)善(shan)廷博士合(he)作，將器官型腦片培養技(ji)(ji)術和高壓冷凍(dong)固(gu)定技(ji)(ji)術相結(jie)合(he)固(gu)定神經纖維，歷時五年的不斷摸索，到(dao)(dao)2007年兩(liang)種技(ji)(ji)術終于(yu)完美地結(jie)合(he)在(zai)一起。趙(zhao)教授(shou)在(zai)接受本(ben)網記者采訪時表示，希望能(neng)夠(gou)與(yu)國內相關課題組(zu)合(he)作，為這種樣品制(zhi)備方法尋找(zhao)更多的應(ying)用領域(yu)。

撰稿：史秀明