美國病理(li)學家協會（CAP）是(shi)(shi)世界最(zui)大的病理(li)學家組織，被(bei)(bei)廣泛公認(ren)為實(shi)驗室質(zhi)量(liang)保證的領導者。CAP認(ren)證在全球被(bei)(bei)公認(ren)為是(shi)(shi)行業(ye)的“金標(biao)準”。CAP認(ren)可(ke)是(shi)(shi)對(dui)實(shi)驗室技(ji)術(shu)管理(li)水平的全面認(ren)可(ke)，通(tong)過(guo)該認(ren)可(ke)意(yi)味著(zhu)診斷(duan)質(zhi)量(liang)與水準進入國際最(zui)高水平行列，并(bing)獲得(de)全球各相關(guan)機構認(ren)可(ke)。

   近(jin)幾年，國內通過CAP這項國際(ji)認證的(de)實驗室越來越多，也有越來越多的(de)機構想(xiang)要(yao)了解CAP認證有哪些(xie)要(yao)求(qiu)，怎么才能具備CAP認證的資質條(tiao)(tiao)件，今天(tian)，小編就跟大家(jia)一起聊一下(xia)CAP認證的基礎要求(qiu)條(tiao)(tiao)件及如何提升(sheng)您的實驗室檢測能力(li)。 

1.實驗室需要建立一個標準操作流程文件

   一(yi)個(ge)詳實(shi)的標準(zhun)操(cao)作流程文件是臨床(chuang)實(shi)驗(yan)室(shi)質(zhi)量評(ping)價的主要部分(fen)。所有的DNA/RNA 樣(yang)品準(zhun)備(bei)、片段化(hua)、文庫準(zhun)備(bei)、 分(fen)子標簽、樣(yang)品混合、合成測序相關實(shi)驗(yan)操(cao)作必須建立標準(zhun)操(cao)作流程文件，這(zhe)樣(yang)才能對每一(yi)步(bu)及(ji)隨后的操(cao)作進行追蹤。

   另外，對于質(zhi)控標準(zhun)也需要(yao)進行描述。 對于不同類型(xing)樣品如血液、石蠟包埋的(de)福爾馬林固定的(de)樣本，都應該制定相應的(de) SOPs。

   用(yong)于將(jiang)病(bing)人樣(yang)本(ben)合(he)并的(de)反(fan)應試劑(ji)和規程必(bi)須詳細說明，并且其中應包含測序接頭信息(xi)。用(yong)于對運行(xing)好壞的(de)評價的(de)質控(kong)參(can)數(shu)的(de)權衡也需要(yao)文(wen)件化。

   常用(yong)的度量(liang)如目標區域內Reads 比例(li)，質(zhi)量(liang)符合規定的堿基比例(li)，覆蓋度的閾值，平均(jun)測序深度。實(shi)驗室必須明文規定好樣品制備和測序的接收或拒收標準(zhun)。

2.NGS 實驗操作平臺驗證 

   實(shi)(shi)驗(yan)室(shi)對 NGS 實(shi)(shi)驗(yan)平臺(tai)進(jin)行驗(yan)證(zheng)(zheng)，當有所修改變動時，要對整個流程再(zai)次進(jin)行驗(yan)證(zheng)(zheng)，確(que)保(bao)流程中每一部分(fen)(fen)的(de)(de)表現符合要求。——如在分(fen)(fen)子診斷領域或臨(lin)床實(shi)(shi)驗(yan)室(shi)的(de)(de)其他領域，所有的(de)(de)實(shi)(shi)驗(yan)室(shi)研發的(de)(de)測試，對 NGS 程序性能分(fen)(fen)析必(bi)須在內部進(jin)行驗(yan)證(zheng)(zheng)后才可(ke)應(ying)用于臨(lin)床。二代(dai)測序實(shi)(shi)驗(yan)平臺(tai)包含很多(duo)步驟(zou)，非常復(fu)雜。 

   每一步驟應分(fen)別根據經驗(yan)綜合決定最(zui)佳(jia)條件和參數設(she)置(zhi)。這些(xie)東西(xi)設(she)置(zhi)好后，必須進行從(cong)開始到結束的全部測試的性能驗(yan)證(zheng)，包括實(shi)驗(yan)平臺和生物信(xin)息分(fen)析平臺。

   在驗證期間(jian)需要確定的(de)重要性能(neng)有分(fen)析的(de)敏(min)感性、特異(yi)性、準確度(du)(du)（接近(jin)真實值的(de)程(cheng)度(du)(du)），精確度(du)(du)（重復(fu)性和可靠性），檢測極限。

   對于任何分子實驗，針對不同的(de)樣品類型（血液(ye)、唾(tuo)液(ye)、組織(zhi)），必須獨立(li)的(de)進行(xing)驗證。 

   因為無法證實所有的理論上可能的變異，所以必(bi)須將 methods-based（其它檢測方法）和analyte-specific（特定分析物）相結合，作為驗證方法來判定檢測的性能。 

   流(liu)程文件的各(ge)個環(huan)節以及結果驗證的各(ge)個環(huan)節都有嚴(yan)(yan)格的要(yao)(yao)求，不同環(huan)節的實驗流(liu)程標準化以及監(jian)控分析條件要(yao)(yao)求嚴(yan)(yan)格。 

  除了申請過程中對(dui)各(ge)種操作規范以及(ji)資質的要求以外，在申請CAP認證之(zhi)前還需(xu)要參(can)加6個(ge)月CAP PT能(neng)(neng)力測試(shi)。獲(huo)得CAP認證以后，還需(xu)要自檢和隔(ge)年復(fu)檢進行檢測能(neng)(neng)力持續改進。