標準曲線的本(ben)質

　　分析檢測中的標準曲線是指一系列已知含量(濃度/量)的物質與儀器響應/信號之間的關系，數學處理就是曲線方程，圖形表示就是標準曲線。標準曲線的目的是可以根據標準曲線查出待測物質的含量。當我們得到一系列已知含量的物質的響應后，就會去建立函數關系，數學上稱曲線擬合，由于直線最為簡單，所以常常用直線方程加以擬合，實驗室認可當然會用到多項式擬合等其他方式。

　　標準(zhun)曲(qu)線的核(he)心(xin)問題要解決：

　　1.能找到(dao)確切濃度的(de)標(biao)準(zhun)物質或標(biao)準(zhun)品;

　　2.標(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)系(xi)列和(he)(he)待測(ce)物質一(yi)定要有(you)相同(tong)和(he)(he)一(yi)致的(de)(de)(de)(de)基體，因(yin)為樣(yang)(yang)品基體可(ke)能會(hui)干擾儀器的(de)(de)(de)(de)響(xiang)應，從這(zhe)個意義上講(jiang)，樣(yang)(yang)品的(de)(de)(de)(de)前處(chu)理(li)實(shi)際就(jiu)是提供標(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)和(he)(he)樣(yang)(yang)品同(tong)樣(yang)(yang)的(de)(de)(de)(de)基體環(huan)境，盡(jin)量祛除干擾基體。所以最(zui)好的(de)(de)(de)(de)標(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)系(xi)列應該(gai)是樣(yang)(yang)品基體匹配(pei)的(de)(de)(de)(de)標(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)系(xi)列。而方法建立過程中首先(xian)要考慮的(de)(de)(de)(de)當然(ran)是基體干擾的(de)(de)(de)(de)問(wen)題(ti)，推薦用(yong)標(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)加(jia)入曲(qu)(qu)線(xian)(xian)(xian)(xian)和(he)(he)Youden曲(qu)(qu)線(xian)(xian)(xian)(xian)分別(bie)考察(cha)樣(yang)(yang)品基體所帶來(lai)的(de)(de)(de)(de)乘積性干擾和(he)(he)加(jia)和(he)(he)性干擾。標(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)加(jia)入曲(qu)(qu)線(xian)(xian)(xian)(xian)就(jiu)是在(zai)樣(yang)(yang)品中加(jia)入一(yi)系(xi)列標(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)，然(ran)后考察(cha)該(gai)標(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)加(jia)入曲(qu)(qu)線(xian)(xian)(xian)(xian)和(he)(he)標(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)曲(qu)(qu)線(xian)(xian)(xian)(xian)斜率的(de)(de)(de)(de)統計學差(cha)(cha)異，若有(you)差(cha)(cha)異需考慮用(yong)標(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)加(jia)入法定量;而Youden曲(qu)(qu)線(xian)(xian)(xian)(xian)就(jiu)是對(dui)(dui)樣(yang)(yang)品做一(yi)系(xi)列稀釋，然(ran)后用(yong)稀釋倍數如1/10、1/5、1/2、1對(dui)(dui)儀器響(xiang)應做曲(qu)(qu)線(xian)(xian)(xian)(xian)，考察(cha)該(gai)Youden曲(qu)(qu)線(xian)(xian)(xian)(xian)的(de)(de)(de)(de)截(jie)距(ju)與(yu)0的(de)(de)(de)(de)差(cha)(cha)別(bie)，若有(you)差(cha)(cha)別(bie)則提示(shi)有(you)加(jia)和(he)(he)性干擾，此時測(ce)定值要減(jian)去該(gai)截(jie)距(ju)才是真(zhen)實(shi)值。只有(you)解決了標(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)(zhun)曲(qu)(qu)線(xian)(xian)(xian)(xian)與(yu)樣(yang)(yang)品基體的(de)(de)(de)(de)匹配(pei)問(wen)題(ti)，我們的(de)(de)(de)(de)定量才可(ke)靠。內標(biao)(biao)(biao)法和(he)(he)替代物的(de)(de)(de)(de)使用(yong)則是為了解決儀器和(he)(he)前處(chu)理(li)的(de)(de)(de)(de)影響(xiang)問(wen)題(ti);

　　標(biao)準(zhun)曲線的做法(fa)

　　按(an)GB/T22554-2010《基于標準(zhun)樣品的線(xian)性校準(zhun)》推薦：

　　1.標(biao)準曲線的濃度范圍應覆蓋正常操作條(tiao)件下的被測量范圍;

　　2.標準樣(yang)品(pin)的(de)組分盡量與被(bei)測樣(yang)品(pin)組分一致;

　　3.標準樣品的(de)濃度值應等距(ju)離(li)的(de)分布在(zai)被測量范圍;

　　4.標準樣品的個(ge)數至(zhi)少應有3個(ge)濃(nong)度(du);

　　5.每個(ge)標(biao)準點至少(shao)重(zhong)(zhong)復2次，這(zhe)個(ge)重(zhong)(zhong)復是指(zhi)從稀釋開始;

　　如果國家標(biao)準(zhun)(zhun)有相應的濃度(du)系列推薦(jian)，盡量按國家標(biao)準(zhun)(zhun)，如果你要偷懶，比(bi)如我要減少(shao)標(biao)準(zhun)(zhun)點，至少(shao)要有理論標(biao)準(zhun)(zhun)支撐，比(bi)如至少(shao)要3個(ge)濃度(du)。工作(zuo)中(zhong)我們經常(chang)采用(yong)線性校準(zhun)(zhun)，因為(wei)線性方程最為(wei)簡(jian)潔(jie)。

　　標準曲(qu)線(xian)的檢驗

　　標(biao)準曲(qu)線(xian)的(de)(de)(de)檢(jian)(jian)(jian)驗(yan)(yan)是實際操作(zuo)中(zhong)最(zui)大的(de)(de)(de)難點(dian)(dian)，也是工作(zuo)中(zhong)誤區(qu)和(he)(he)爭(zheng)議(yi)最(zui)多(duo)的(de)(de)(de)話題，比如，GB/T 5750.3-2006就將標(biao)準曲(qu)線(xian)的(de)(de)(de)檢(jian)(jian)(jian)驗(yan)(yan)分為：精密(mi)度(du)檢(jian)(jian)(jian)驗(yan)(yan)，截距檢(jian)(jian)(jian)驗(yan)(yan)和(he)(he)斜率檢(jian)(jian)(jian)驗(yan)(yan)，但，并未出示具(ju)體的(de)(de)(de)檢(jian)(jian)(jian)驗(yan)(yan)方法。首先(xian)講(jiang)講(jiang)這三個檢(jian)(jian)(jian)驗(yan)(yan)，標(biao)準曲(qu)線(xian)的(de)(de)(de)精密(mi)度(du)檢(jian)(jian)(jian)驗(yan)(yan)，實際含義就是做出來(lai)的(de)(de)(de)試驗(yan)(yan)點(dian)(dian)在我擬合的(de)(de)(de)直(zhi)(zhi)線(xian)方程左右的(de)(de)(de)分布情況(kuang)，標(biao)準曲(qu)線(xian)是所有點(dian)(dian)以最(zui)小二乘算法(OLS)擬合出來(lai)的(de)(de)(de)，這條曲(qu)線(xian)到所有點(dian)(dian)的(de)(de)(de)垂直(zhi)(zhi)距離的(de)(de)(de)和(he)(he)(殘差)是最(zui)小的(de)(de)(de)。

　　因(yin)此(ci)，這(zhe)條(tiao)曲線(xian)并非通過所(suo)有(you)點(dian)而(er)是非常(chang)接(jie)近(jin)所(suo)有(you)點(dian)，精密度檢(jian)驗就是看這(zhe)些試驗點(dian)距(ju)離擬合(he)的(de)(de)直線(xian)的(de)(de)距(ju)離有(you)無異常(chang)，所(suo)以(yi)也稱線(xian)性檢(jian)驗(擬合(he)檢(jian)驗)。這(zhe)時的(de)(de)精密度(線(xian)性檢(jian)驗)需用(yong)F檢(jian)驗，P<0.05作為線(xian)性檢(jian)驗合(he)格的(de)(de)標準。

　　標(biao)準(zhun)(zhun)曲(qu)線的截(jie)距檢驗和(he)斜率檢驗分別考察(cha)Y=a+bX中(zhong)a和(he)b與(yu)(yu)0的統計學差異，a與(yu)(yu)0有差別說(shuo)明有試劑空白或系(xi)統誤差，而b若與(yu)(yu)0沒差別說(shuo)明儀器的靈敏度(du)根本達(da)不(bu)到分析要(yao)求。日(ri)常(chang)工作中(zhong)我(wo)們通常(chang)用相關系(xi)數來作為標(biao)準(zhun)(zhun)曲(qu)線好壞的標(biao)準(zhun)(zhun)，這(zhe)點(dian)有一(yi)定道(dao)理，但(dan)并不(bu)全(quan)面。

　　決(jue)定系數是相關(guan)系數的(de)(de)平方(fang)，就(jiu)是我們經常在儀器軟件中(zhong)看到的(de)(de)R2或Fit，它提示的(de)(de)是我建立的(de)(de)回歸方(fang)程(cheng)所解釋X對Y變(bian)(bian)化占(zhan)Y變(bian)(bian)量的(de)(de)比(bi)值，比(bi)如(ru)決(jue)定系數是0.99也就(jiu)是說(shuo)我這個(ge)(ge)回歸方(fang)程(cheng)可以解釋Y變(bian)(bian)化的(de)(de)99%，剩下的(de)(de)1%就(jiu)是殘(can)差。前面提到的(de)(de)精(jing)密度(線性檢(jian)驗)就(jiu)是用(yong)這兩部分的(de)(de)變(bian)(bian)化做F檢(jian)驗，由(you)于統計檢(jian)驗的(de)(de)臨界值比(bi)較大，通常0.90以上(shang)的(de)(de)相關(guan)系數都會(hui)通過(guo)這個(ge)(ge)F檢(jian)驗，當然還與(yu)實(shi)驗點數(自由(you)度)有關(guan)。

　　這里要提到GB/T22554-2010《基(ji)于標準樣品的(de)(de)線性校準》中(zhong)關于失(shi)擬(ni)檢(jian)驗(yan)的(de)(de)問題，這里的(de)(de)失(shi)擬(ni)檢(jian)驗(yan)是要看曲線擬(ni)合后剩(sheng)下殘差(cha)(cha)(cha)與(yu)實驗(yan)數據(ju)本(ben)身隨(sui)機(ji)誤差(cha)(cha)(cha)(變異(yi))之間的(de)(de)差(cha)(cha)(cha)別(bie)，同樣采用(yong)F檢(jian)驗(yan)，此(ci)時失(shi)擬(ni)檢(jian)驗(yan)P應該(gai)>0.05，也就是說(shuo)殘差(cha)(cha)(cha)應該(gai)跟實驗(yan)測定(ding)中(zhong)的(de)(de)隨(sui)機(ji)誤差(cha)(cha)(cha)(變異(yi))沒有差(cha)(cha)(cha)別(bie)，你要看每次(ci)測定(ding)的(de)(de)隨(sui)機(ji)誤差(cha)(cha)(cha)(變異(yi))就必須多次(ci)測定(ding)同一濃度(du)，因此(ci)失(shi)擬(ni)檢(jian)驗(yan)要求每個濃度(du)點至少重復(fu)2次(ci)。

　　除(chu)此之外，最后我們還要看看這些殘(can)差(cha)的分(fen)布是否是正(zheng)態的，因為(wei)，正(zheng)態才(cai)符(fu)合隨機誤差(cha)的特性(xing)(xing)。綜上所述，標準曲線的檢(jian)驗應該是線性(xing)(xing)檢(jian)驗結合失擬檢(jian)驗，以及(ji)殘(can)差(cha)的正(zheng)態性(xing)(xing)檢(jian)驗結合才(cai)是統(tong)計學(xue)上比較(jiao)完備(bei)的。

　　通(tong)常(chang)我們(men)采(cai)用的相(xiang)關系(xi)數(shu)0.99以上(shang)的說法(fa)缺乏統計(ji)完(wan)備(bei)性。正如(ru)大家經常(chang)看(kan)到(dao)的改變(bian)(bian)擬合(he)的參數(shu)個(ge)數(shu)，如(ru)二次方(fang)程(cheng)明顯能提高相(xiang)關系(xi)數(shu)，但是(shi)我們(men)經常(chang)沒(mei)有勇氣去(qu)用二次曲(qu)線方(fang)程(cheng)，因為你沒(mei)有統計(ji)學(xue)上(shang)完(wan)備(bei)的支撐。如(ru)果你發現(xian)標準曲(qu)線在低濃(nong)度和高濃(nong)度點的變(bian)(bian)異程(cheng)度不同(tong)(非等(deng)方(fang)差(cha))，此時你應該考慮權重最小二乘(WLS)。

　　標(biao)準曲線使用中(zhong)的問題

　　1.標準(zhun)曲線需要人為的增加(0,0)點嗎?

　　不能(neng)。通常(chang)的標(biao)(biao)(biao)準(zhun)系列(lie)(lie)多是(shi)配制(zhi)0,1,2,3mg/L系列(lie)(lie)這樣(yang)的說法，沒(mei)做(zuo)實(shi)驗人(ren)為添(tian)加(jia)(0,0)很(hen)不妥，因為很(hen)多時(shi)候0管進入儀(yi)器(qi)可能(neng)也(ye)(ye)有響(xiang)應(ying)值，這也(ye)(ye)是(shi)我(wo)們考(kao)察試劑空白的一(yi)個重(zhong)要(yao)步驟(zou)。這個0管在某些(xie)時(shi)候非常(chang)重(zhong)要(yao)，比如全血鉛(qian)測(ce)定，我(wo)們采用(yong)牛血清來基(ji)體匹(pi)配標(biao)(biao)(biao)準(zhun)系列(lie)(lie)，如果此(ci)時(shi)你用(yong)酸做(zuo)空白或沒(mei)做(zuo)實(shi)驗人(ren)為添(tian)加(jia)(0,0)，那你就很(hen)難做(zuo)好標(biao)(biao)(biao)準(zhun)曲線(xian)。所以標(biao)(biao)(biao)準(zhun)曲線(xian)的0管也(ye)(ye)是(shi)做(zuo)好標(biao)(biao)(biao)準(zhun)曲線(xian)的重(zhong)要(yao)考(kao)慮點。

　　2.標準(zhun)曲線需要減掉試劑空白來做嗎?

　　不需(xu)要(yao)(yao)。儀器(qi)測出來(lai)標準系列的(de)響(xiang)應(ying)值(zhi)(zhi)可以減掉試劑(ji)空白或減掉0管的(de)響(xiang)應(ying)值(zhi)(zhi)來(lai)做，工作中我們也常(chang)用0管來(lai)做儀器(qi)調(diao)零。其實(shi)沒(mei)有必要(yao)(yao)那么麻煩，即使空白或0管有響(xiang)應(ying)值(zhi)(zhi)，在構建(jian)標準曲線時，我們已經認為(wei)該響(xiang)應(ying)值(zhi)(zhi)就是(shi)0濃度(du)，也就是(shi)扣除了(le)這個空白的(de)。

　　3.什么時候用Y=bX和二次(ci)曲線呢?

　　標準曲線(xian)(xian)(xian)我們通(tong)常采用的(de)(de)是(shi)Y=a+bX，曲線(xian)(xian)(xian)擬(ni)合(he)(he)完(wan)必須要做(zuo)統(tong)計檢(jian)(jian)驗(yan)，且(qie)要做(zuo)統(tong)計完(wan)備的(de)(de)線(xian)(xian)(xian)性(xing)檢(jian)(jian)驗(yan)和失擬(ni)檢(jian)(jian)驗(yan)，然后再做(zuo)a與(yu)0的(de)(de)差別(bie)檢(jian)(jian)驗(yan)，如(ru)果a與(yu)0的(de)(de)統(tong)計學(xue)上無差異，你(ni)(ni)就(jiu)可以考慮用Y=bX的(de)(de)擬(ni)合(he)(he)曲線(xian)(xian)(xian)，擬(ni)合(he)(he)出來后同(tong)(tong)樣做(zuo)線(xian)(xian)(xian)性(xing)檢(jian)(jian)驗(yan)和失擬(ni)檢(jian)(jian)驗(yan)，如(ru)果線(xian)(xian)(xian)性(xing)檢(jian)(jian)驗(yan)合(he)(he)格(ge)(ge)(P<0.05)且(qie)失擬(ni)檢(jian)(jian)驗(yan)合(he)(he)格(ge)(ge)(P>0.05)此時(shi)你(ni)(ni)就(jiu)可以采用Y=bX。二次曲線(xian)(xian)(xian)的(de)(de)采用同(tong)(tong)樣是(shi)這樣的(de)(de)道理，如(ru)果你(ni)(ni)Y=a+bX時(shi)擬(ni)合(he)(he)不合(he)(he)格(ge)(ge)，你(ni)(ni)就(jiu)考慮用Y=a+bX+cX2，同(tong)(tong)樣做(zuo)失擬(ni)檢(jian)(jian)驗(yan)，考察擬(ni)合(he)(he)的(de)(de)符合(he)(he)情況。如(ru)果Y=a+bX 和Y=a+bX+cX2都滿足擬(ni)合(he)(he)檢(jian)(jian)驗(yan)和失擬(ni)檢(jian)(jian)驗(yan)合(he)(he)格(ge)(ge)，則(ze)采用Y=a+bX形(xing)式，這樣符合(he)(he)統(tong)計學(xue)上參數(shu)最少的(de)(de)統(tong)計簡(jian)潔性(xing)原則(ze)。

　　4.標準(zhun)曲線去查(cha)含(han)量時(shi)是先(xian)減空(kong)白信號算樣(yang)品含(han)量還是先(xian)算出空(kong)白含(han)量相(xiang)減呢?

　　工作中我們常要(yao)減(jian)掉空(kong)白(bai)得到樣(yang)(yang)品含量(liang)(liang)，現有國家標準(zhun)(zhun)方法有的(de)推(tui)薦先算(suan)(suan)(suan)出空(kong)白(bai)含量(liang)(liang)，用樣(yang)(yang)品含量(liang)(liang)相(xiang)減(jian)，也有推(tui)薦先用樣(yang)(yang)品信(xin)(xin)號減(jian)空(kong)白(bai)信(xin)(xin)號然(ran)后去標準(zhun)(zhun)曲線推(tui)算(suan)(suan)(suan)含量(liang)(liang)。而且(qie)這(zhe)兩(liang)種(zhong)(zhong)算(suan)(suan)(suan)法常常差(cha)距很大(da)。其實這(zhe)種(zhong)(zhong)差(cha)距往(wang)往(wang)是(shi)低含量(liang)(liang)水(shui)平時(shi)才出現，在(zai)低含量(liang)(liang)水(shui)平通(tong)過標準(zhun)(zhun)曲線推(tui)算(suan)(suan)(suan)含量(liang)(liang)時(shi)，本身不確定(ding)(ding)度就很大(da)。這(zhe)兩(liang)種(zhong)(zhong)方法都可以。個人(ren)推(tui)薦先用樣(yang)(yang)品信(xin)(xin)號減(jian)空(kong)白(bai)信(xin)(xin)號然(ran)后去標準(zhun)(zhun)曲線推(tui)算(suan)(suan)(suan)含量(liang)(liang)，因為(wei)這(zhe)樣(yang)(yang)出來的(de)含量(liang)(liang)不確定(ding)(ding)度要(yao)小一(yi)些，而先算(suan)(suan)(suan)出空(kong)白(bai)含量(liang)(liang)再相(xiang)減(jian)就增加了(le)1次標準(zhun)(zhun)曲線推(tui)算(suan)(suan)(suan)含量(liang)(liang)時(shi)的(de)不確定(ding)(ding)度，因為(wei)好的(de)測(ce)量(liang)(liang)永遠(yuan)是(shi)不確定(ding)(ding)度小的(de)測(ce)量(liang)(liang)。

　　5.如何做兩條(tiao)標準(zhun)曲線的檢(jian)驗呢?

　　先從原(yuan)(yuan)理上講：判斷兩(liang)條或多條標(biao)準曲線(xian)的(de)(de)差(cha)(cha)(cha)(cha)(cha)(cha)異(yi)(yi)，須檢驗殘(can)差(cha)(cha)(cha)(cha)(cha)(cha)，截(jie)(jie)(jie)距(ju)(ju)和斜率(lv)(lv)三(san)項，分(fen)別有不(bu)同的(de)(de)統(tong)計(ji)學參數(shu)，殘(can)差(cha)(cha)(cha)(cha)(cha)(cha)用F檢驗，截(jie)(jie)(jie)距(ju)(ju)和斜率(lv)(lv)采用較為(wei)復雜的(de)(de)統(tong)計(ji)量(liang)(liang)。2、從實際(ji)操作講：多用協(xie)方(fang)(fang)差(cha)(cha)(cha)(cha)(cha)(cha)分(fen)析檢驗截(jie)(jie)(jie)距(ju)(ju)和斜率(lv)(lv)的(de)(de)差(cha)(cha)(cha)(cha)(cha)(cha)異(yi)(yi)，以SPSS為(wei)例：1.先重新整理數(shu)據(ju)(ju),將(jiang)y2數(shu)據(ju)(ju)列(lie)加到(dao)(dao)y1下(xia)(xia)面,變成一(yi)個(ge)變量(liang)(liang)y;將(jiang)x2數(shu)據(ju)(ju)列(lie)加到(dao)(dao)x1下(xia)(xia)面,變成一(yi)個(ge)變量(liang)(liang)x;然后再(zai)設(she)定一(yi)個(ge)新的(de)(de)分(fen)組變量(liang)(liang)group,原(yuan)(yuan)來第(di)1組值(zhi)(zhi)(zhi)為(wei)1,第(di)2組值(zhi)(zhi)(zhi)為(wei)2. 2.進行協(xie)方(fang)(fang)差(cha)(cha)(cha)(cha)(cha)(cha)分(fen)析(第(di)一(yi)步(bu)分(fen)析斜率(lv)(lv)是否(fou)無(wu)差(cha)(cha)(cha)(cha)(cha)(cha)異(yi)(yi)).Analyze->GeneralLinear Model->Univariate Dependent List:填(tian)(tian)入(ru)y---------將(jiang)y做為(wei)因(yin)變量(liang)(liang) Fixed Factor:填(tian)(tian)入(ru)group Covaraites:填(tian)(tian)入(ru)x--------將(jiang)x做為(wei)協(xie)變量(liang)(liang) Model:選Custom Model:填(tian)(tian)入(ru) x groupx*group---------注(zhu)意如(ru)(ru)果變量(liang)(liang)填(tian)(tian)入(ru)順序不(bu)一(yi)樣,結(jie)(jie)果也會不(bu)一(yi)樣. Sum ofsquares下(xia)(xia)拉列(lie)表框(kuang):選TypeI 然后點擊ok,看(kan)結(jie)(jie)果里x*group這一(yi)行的(de)(de)Sig.P值(zhi)(zhi)(zhi),若大于(yu)(yu)0.05,則接受原(yuan)(yuan)假設(she),即兩(liang)條回(hui)歸直(zhi)線(xian)的(de)(de)斜率(lv)(lv)無(wu)差(cha)(cha)(cha)(cha)(cha)(cha)異(yi)(yi),否(fou)則拒絕. 3.再(zai)來進行截(jie)(jie)(jie)距(ju)(ju)的(de)(de)無(wu)差(cha)(cha)(cha)(cha)(cha)(cha)異(yi)(yi)分(fen)析其實過程跟上面一(yi)樣,只是Model里去掉了x*group交叉項.Analyze->GeneralLinear Model->Univariate Dependent List:填(tian)(tian)入(ru)y---------將(jiang)y做為(wei)因(yin)變量(liang)(liang) Fixed Factor:填(tian)(tian)入(ru)group Covaraites:填(tian)(tian)入(ru)x--------將(jiang)x做為(wei)協(xie)變量(liang)(liang) Model:選Custom Model:填(tian)(tian)入(ru) x group ---------注(zhu)意如(ru)(ru)果變量(liang)(liang)填(tian)(tian)入(ru)順序不(bu)一(yi)樣,結(jie)(jie)果也會不(bu)一(yi)樣. Sum of squares下(xia)(xia)拉列(lie)表框(kuang):選TypeI 點擊ok后,看(kan)group一(yi)行的(de)(de)Sig.P值(zhi)(zhi)(zhi),若P值(zhi)(zhi)(zhi)大于(yu)(yu)0.05說明(ming)兩(liang)條回(hui)歸直(zhi)線(xian)截(jie)(jie)(jie)距(ju)(ju)也無(wu)差(cha)(cha)(cha)(cha)(cha)(cha)異(yi)(yi),若小于(yu)(yu)0.05說明(ming)截(jie)(jie)(jie)距(ju)(ju)是有差(cha)(cha)(cha)(cha)(cha)(cha)異(yi)(yi)的(de)(de)。

　　6.標(biao)準系列的標(biao)準溶液(ye)體積取用中有效(xiao)數字該(gai)如何寫呢?

　　標(biao)準溶液體(ti)(ti)(ti)積(ji)(ji)取用(yong)(yong)(yong)的(de)(de)(de)有效(xiao)數字跟你(ni)采(cai)用(yong)(yong)(yong)的(de)(de)(de)體(ti)(ti)(ti)積(ji)(ji)量(liang)具(ju)(ju)有直接關系。比如(ru)說量(liang)取或準確(que)(que)量(liang)取等字眼(yan)，10mL和10.0mL提示你(ni)要(yao)采(cai)用(yong)(yong)(yong)不同的(de)(de)(de)量(liang)具(ju)(ju)。當我(wo)(wo)們使用(yong)(yong)(yong)某個(ge)量(liang)具(ju)(ju)完(wan)成某次體(ti)(ti)(ti)積(ji)(ji)取用(yong)(yong)(yong)后，讀(du)數是(shi)(shi)按照量(liang)具(ju)(ju)的(de)(de)(de)最小允差決定(ding)的(de)(de)(de)，而最小允差是(shi)(shi)針對最小分(fen)(fen)(fen)度線(xian)而言的(de)(de)(de)。當取用(yong)(yong)(yong)10mL體(ti)(ti)(ti)積(ji)(ji)時，如(ru)果(guo)(guo)(guo)用(yong)(yong)(yong)A級(ji)10mL的(de)(de)(de)分(fen)(fen)(fen)度吸管，那么10.0mL應該是(shi)(shi)確(que)(que)定(ding)的(de)(de)(de)，因(yin)為(wei)它的(de)(de)(de)分(fen)(fen)(fen)度線(xian)為(wei)0.1mL。當取用(yong)(yong)(yong)1mL體(ti)(ti)(ti)積(ji)(ji)時，如(ru)果(guo)(guo)(guo)用(yong)(yong)(yong)A級(ji)1mL的(de)(de)(de)分(fen)(fen)(fen)度吸管，那么1.00mL應該是(shi)(shi)確(que)(que)定(ding)的(de)(de)(de)，因(yin)為(wei)它的(de)(de)(de)分(fen)(fen)(fen)度線(xian)為(wei)0.01mL。所以(yi)(yi)我(wo)(wo)個(ge)人意見，到底寫10.00還是(shi)(shi)10.0以(yi)(yi)最小分(fen)(fen)(fen)度線(xian)來確(que)(que)定(ding)，最小分(fen)(fen)(fen)度線(xian)以(yi)(yi)下的(de)(de)(de)都(dou)為(wei)估讀(du)。如(ru)果(guo)(guo)(guo)你(ni)認為(wei)估讀(du)也是(shi)(shi)有效(xiao)數字的(de)(de)(de)話，10.00mL也可以(yi)(yi)，因(yin)為(wei)此時的(de)(de)(de)容量(liang)允差為(wei)0.05mL，但(dan)1.000mL就沒有太大意義了(le)，因(yin)為(wei)A級(ji)1mL的(de)(de)(de)分(fen)(fen)(fen)度吸管的(de)(de)(de)容量(liang)允差已(yi)經是(shi)(shi)0.008mL了(le)。

　　7.標(biao)準曲線的相(xiang)關(guan)系數(shu)(shu)的有(you)效數(shu)(shu)字該如(ru)何保留(liu)呢?

　　GB5750.3-20068.2.7項有(you)如下(xia)規定：校(xiao)準曲線相關系(xi)數(shu)(shu)只舍(she)不(bu)入，保留到小數(shu)(shu)點(dian)后出現(xian)非9的一位，如0.99989→0.9998。如果小數(shu)(shu)點(dian)后都是(shi)9時，最多保留小數(shu)(shu)點(dian)后4位。

　　8.標(biao)準曲線可以用同(tong)一濃度不同(tong)體(ti)積的進樣來做嗎?

　　標(biao)準(zhun)系(xi)列(lie)一般都(dou)是(shi)(shi)配制(zhi)不(bu)同(tong)濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)，進(jin)樣(yang)相同(tong)體(ti)(ti)積(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)來(lai)(lai)做(zuo)的(de)(de)(濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)法(fa)(fa))。但實際工作中(zhong)我(wo)們還(huan)用到同(tong)一濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)來(lai)(lai)進(jin)樣(yang)不(bu)同(tong)體(ti)(ti)積(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)的(de)(de)方式(shi)來(lai)(lai)做(zuo)(體(ti)(ti)積(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)法(fa)(fa))，濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)法(fa)(fa)與體(ti)(ti)積(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)法(fa)(fa)的(de)(de)區(qu)別在于濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)法(fa)(fa)中(zhong)與待測(ce)物(wu)質存在的(de)(de)溶劑/待測(ce)物(wu)質的(de)(de)比(bi)例與體(ti)(ti)積(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)法(fa)(fa)不(bu)同(tong)。濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)法(fa)(fa)中(zhong)溶劑的(de)(de)環境(體(ti)(ti)積(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji))基本(ben)是(shi)(shi)一致(zhi)的(de)(de)，這樣(yang)的(de)(de)好(hao)處(chu)就是(shi)(shi)濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)法(fa)(fa)在判斷溶劑(或溶劑中(zhong)干(gan)擾(rao)物(wu)質)和(he)待測(ce)物(wu)質的(de)(de)指(zhi)(zhi)認上更加(jia)容(rong)(rong)(rong)易。體(ti)(ti)積(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)法(fa)(fa)中(zhong)干(gan)擾(rao)物(wu)質也會隨標(biao)準(zhun)系(xi)列(lie)增(zeng)加(jia)，不(bu)容(rong)(rong)(rong)易實現待測(ce)物(wu)質的(de)(de)指(zhi)(zhi)認。從進(jin)樣(yang)針，進(jin)小體(ti)(ti)積(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)時不(bu)確(que)定度(du)(du)比(bi)較大，帶來(lai)(lai)的(de)(de)直接結果時標(biao)準(zhun)曲(qu)線不(bu)如濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)法(fa)(fa)容(rong)(rong)(rong)易做(zuo)直。而且物(wu)理體(ti)(ti)積(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)的(de)(de)限制(zhi)，體(ti)(ti)積(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)法(fa)(fa)不(bu)太(tai)容(rong)(rong)(rong)易實現較大跨(kua)(kua)度(du)(du)的(de)(de)濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)系(xi)列(lie)設置。總之，體(ti)(ti)積(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)(ji)法(fa)(fa)和(he)濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)法(fa)(fa)本(ben)質上是(shi)(shi)一致(zhi)的(de)(de)，但濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)法(fa)(fa)有：容(rong)(rong)(rong)易做(zuo)好(hao)標(biao)準(zhun)曲(qu)線，容(rong)(rong)(rong)易實現較大濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)跨(kua)(kua)度(du)(du)和(he)容(rong)(rong)(rong)易實現待測(ce)物(wu)質的(de)(de)指(zhi)(zhi)認等優(you)點。

　　9.標準曲線查出樣品(pin)是負(fu)值(zhi)，如何(he)報告結果呢?

　　這(zhe)種情況下我們(men)一般選擇四(si)種方(fang)式(shi)報(bao)告(gao)結(jie)果：未檢(jian)出，<檢(jian)出限(xian)，<定(ding)(ding)量限(xian)，<標準(zhun)曲(qu)線第一點所(suo)推算(suan)(suan)(suan)的(de)(de)(de)樣(yang)品濃(nong)度。四(si)種都有(you)道(dao)理，實(shi)際區(qu)別是(shi)埋在(zai)四(si)種選擇下面的(de)(de)(de)結(jie)果報(bao)告(gao)人的(de)(de)(de)風險。未檢(jian)出的(de)(de)(de)全部含義應該是(shi)本實(shi)驗室本儀器(qi)(qi)本方(fang)法(fa)未檢(jian)出，如果沒(mei)有(you)這(zhe)些(xie)界(jie)定(ding)(ding)，未檢(jian)出的(de)(de)(de)歧義很多，而且沒(mei)有(you)提(ti)供其(qi)它任何(he)可(ke)用的(de)(de)(de)信息。所(suo)以(yi)(yi)我建議學生一般不(bu)采(cai)用這(zhe)種報(bao)告(gao)方(fang)法(fa);檢(jian)出限(xian)是(shi)定(ding)(ding)性檢(jian)出的(de)(de)(de)標志(zhi)，它是(shi)跟空白的(de)(de)(de)統計(ji)(ji)比(bi)較計(ji)(ji)算(suan)(suan)(suan)出來的(de)(de)(de)。每(mei)(mei)臺儀器(qi)(qi)，每(mei)(mei)次測(ce)定(ding)(ding)都有(you)其(qi)檢(jian)出限(xian)，檢(jian)出限(xian)計(ji)(ji)算(suan)(suan)(suan)目前有(you)兩大(da)類計(ji)(ji)算(suan)(suan)(suan)方(fang)法(fa)：單(dan)濃(nong)度方(fang)法(fa)和校正(zheng)設計(ji)(ji)法(fa)(Anal.Chem.1997,69:3069)，常(chang)規采(cai)用的(de)(de)(de)單(dan)濃(nong)度方(fang)法(fa)需要(yao)額外的(de)(de)(de)工(gong)作，所(suo)以(yi)(yi)現在(zai)趨向用校正(zheng)設計(ji)(ji)法(fa)，既利(li)用標準(zhun)曲(qu)線直(zhi)接(jie)計(ji)(ji)算(suan)(suan)(suan)檢(jian)出限(xian)，但檢(jian)出限(xian)I類和II類錯誤(wu)皆控制(zhi)在(zai)0.05。

　　定量限是可(ke)以定量檢(jian)(jian)出(chu)的(de)(de)(de)標志，其(qi)RSD定為10%，其(qi)II類(lei)錯(cuo)誤(wu)比檢(jian)(jian)出(chu)限小(xiao)很多。<標準曲線第(di)一(yi)點所(suo)推(tui)算的(de)(de)(de)樣(yang)品(pin)濃(nong)度，是我(wo)們儀器比較可(ke)信的(de)(de)(de)測定濃(nong)度。總之，報(bao)告(gao)<檢(jian)(jian)出(chu)限，<定量限，<標準曲線第(di)一(yi)點所(suo)推(tui)算的(de)(de)(de)樣(yang)品(pin)濃(nong)度所(suo)犯I類(lei)和II類(lei)錯(cuo)誤(wu)依次降低，但(dan)(dan)如(ru)果(guo)這個報(bao)告(gao)結果(guo)已經(jing)超過你(ni)要判斷的(de)(de)(de)限值，那么你(ni)的(de)(de)(de)檢(jian)(jian)測就(jiu)一(yi)點意義(yi)都沒有了(le)。所(suo)以現在的(de)(de)(de)檢(jian)(jian)測單位甚至直(zhi)接報(bao)告(gao)小(xiao)于國家標準規定的(de)(de)(de)限值，從概率(lv)(lv)統(tong)計的(de)(de)(de)角度講，它(ta)犯錯(cuo)誤(wu)的(de)(de)(de)幾率(lv)(lv)最小(xiao)，但(dan)(dan)又解決了(le)客(ke)戶的(de)(de)(de)檢(jian)(jian)測問題(ti)。

　　10.空白(bai)測出(chu)來是負(fu)值，該不該減呢?

　　空(kong)白(bai)代表你所選擇的(de)(de)空(kong)白(bai)對儀(yi)器響應(ying)/信(xin)號的(de)(de)影響，當然(ran)可(ke)能是正方向和負方向的(de)(de)影響，所以理論上講必須減掉空(kong)白(bai)。至于是先(xian)減空(kong)白(bai)信(xin)號，還(huan)是減空(kong)白(bai)測定(ding)值(zhi)，按(an)國家(jia)規(gui)定(ding)或(huo)參(can)見4問題。

　　11.線性范圍(wei)(動態范圍(wei))的最低(di)點和最高點如何確定呢?

　　配(pei)置一系列濃度標準，包括0濃度，從低濃度開始擬(ni)合當擬(ni)合檢驗出現P>0.05的最高的那(nei)個濃度點為止(zhi)。有也經(jing)驗說(shuo)當加入的高濃度點在(zai)低濃度點構(gou)建的直線(xian)方程推算的響應超出±10%范圍。關于線(xian)性(xing)范圍的最低點應該是(shi)0、檢出限或是(shi)定量(liang)限的問題，個人趨向最低點為0，因為線(xian)性(xing)范圍只是(shi)統計學上線(xian)性(xing)的表現，跟能否準確定量(liang)是(shi)兩方面的問題。