按(an)國家(jia)實(shi)(shi)驗室(shi)(shi)(shi)認可的(de)概念，是(shi)(shi)指一(yi)個(ge)能(neng)夠承(cheng)擔法律責任的(de)實(shi)(shi)體。這里所(suo)指的(de)是(shi)(shi)實(shi)(shi)驗室(shi)(shi)(shi)（微檢室(shi)(shi)(shi)）內建立的(de)質量管(guan)理的(de)保證(zheng)體系。人(ren)員、房(fang)屋 設備滿足檢測工作需要。

1、人員要求(qiu)

實驗室人(ren)(ren)員的(de)分類：管(guan)理(li)人(ren)(ren)員、技(ji)術人(ren)(ren)員、技(ji)術支持人(ren)(ren)員等。

相應崗位的(de)人(ren)員(yuan)，應具備相應的(de)技(ji)術能力，相應的(de)技(ji)術能力證(zheng)明(ming)（證(zheng)書及證(zheng)件）。

微生物檢(jian)驗室因有相應(ying)技(ji)術能力的人負(fu)責室內的技(ji)術工作。并(bing)設立質量監督(du)員。

2、房(fang)屋(wu)條件要求(qiu)

房(fang)屋要(yao)求：具有(you)適宜(yi)、足(zu)夠寬敞、通風有(you)良好的(de)照明。

房(fang)屋內墻面及地等應(ying)采用易于清(qing)潔的(de)材料，保持房(fang)間(jian)清(qing)潔。

房(fang)(fang)間的設置(zhi)，以其開展的工作內容加以分(fen)用，設立專用房(fang)(fang)間。

房間的大小還應(ying)根(gen)據(ju)從事實驗人員的進入(ru)數量上(shang)加以考慮。

3、環境設(she)施要求

專用(yong)房間(jian)的溫(wen)濕度控制與記錄（樣品存放(fang)室）

特殊(shu)環境的微生物指標控制與記錄（無菌室等）

專用(yong)工作室的(de)(de)標準(zhun)(zhun)操(cao)作規(gui)程(cheng)和(he)定期的(de)(de)檢(jian)測(ce)校準(zhun)(zhun)程(cheng)序。（潔凈室等）

特殊環境(jing)中的專用設施質量控制應符合有關要(yao)求（凈化工作臺）

微生(sheng)物檢驗常用需(xu)監(jian)控的設備和儀(yi)器：

1、培養箱(xiang)(xiang)（生化培養箱(xiang)(xiang)或(huo)CO2培養箱(xiang)(xiang)等）、干燥箱(xiang)(xiang)、高(gao)壓滅菌鍋、凈化工(gong)作臺、pH計(ji)、 冰箱(xiang)(xiang)，（低溫(wen)冰箱(xiang)(xiang)或(huo)冷柜(ju)）溫(wen)度計(ji)、紫外燈、顯微鏡、離心機、天平、。

2、小計(ji)量(liang)容器

3、微(wei)生物測定儀(yi)器、微(wei)生物檢定儀(yi)器、空氣采樣器、酶標儀(yi)專用(yong)等。

1、高壓(ya)滅(mie)菌(jun)鍋的溫度控(kong)制

高(gao)壓(ya)(ya)滅(mie)菌(jun)鍋(guo)(guo)；生物指示菌(jun)法（常用）、化學變色紙片及高(gao)壓(ya)(ya)滅(mie)菌(jun)鍋(guo)(guo)溫度計等方(fang)法進行檢測(ce)。

生物指示(shi)菌法是一種高壓(ya)滅菌鍋的效果顯(xian)示(shi)法。

高壓滅(mie)菌鍋由專人按作(zuo)業指(zhi)導書操作(zuo)，并(bing)做好(hao)每一次的作(zuo)業記錄。

高壓(ya)滅菌鍋使用時，內(nei)置物品不(bu)能太多(duo)，單位體積內(nei)的內(nei)容物（每瓶內(nei)的培養基）不(bu)能太多(duo)。同時應注(zhu)意內(nei)容物不(bu)同耐受溫度。總的暴(bao)露時間最好不(bu)要超過(guo)45min。

高壓滅(mie)菌鍋(guo)日常工作記(ji)錄(lu)應(ying)包含以下信息：高壓滅(mie)菌的(de)材料(liao)、開始時(shi)間、壓力/溫度、取出時(shi)間、高壓滅(mie)菌膠帶的(de)顏(yan)色變(bian)化(hua)（日常常用無菌培養代替）

高壓滅菌鍋溫度(du)波動范圍：110，115和121±2℃。

高壓滅菌鍋校準周(zhou)期(qi)一般在(zai)半年。

2、干燥(zao)滅菌箱溫度控制

干燥滅菌箱(xiang)日(ri)常工作記錄中應(ying)包括以下信息：開始(shi)的(de)時(shi)(shi)間、到達滅菌溫度時(shi)(shi)的(de)時(shi)(shi)間、取出的(de)時(shi)(shi)間（或關閉(bi)時(shi)(shi)間）。

干燥滅菌箱的溫(wen)(wen)(wen)度(du)校準；用參考溫(wen)(wen)(wen)度(du)計進(jin)行溫(wen)(wen)(wen)度(du)測(ce)試。

干燥(zao)滅菌(jun)箱溫度要(yao)求與精確度：160±5 ℃或180 ±5 ℃。前者為滅菌(jun)2h，后者為30min。

干(gan)燥(zao)滅(mie)菌(jun)箱校準時間一般為一年。

3、培養基配制用蒸(zheng)餾水的控制

對于蒸餾水器來說(shuo)：按(an)設備說(shuo)明，定期清潔離子(zi)(zi)交(jiao)換器和(he)更(geng)換離子(zi)(zi)交(jiao)換材料(liao)。

檢(jian)(jian)測要求：西(xi)歐標(biao)(biao)準為微生物檢(jian)(jian)驗用(yong)蒸餾(liu)水的特定電導(dao)率(lv)＜0.5ms/m；細菌數＜50CFU/mL。我們日(ri)常用(yong)的標(biao)(biao)準為 ＜10ms/m，未見(jian)有細菌指標(biao)(biao)。

檢測頻率：1次(ci)/每月。

蒸餾(liu)水定點供(gong)應(ying)，并做好相應(ying)的質量控制(zhi)，記錄檢(jian)測(ce)結果。

4、天(tian)平的管(guan)理

天平放置要求(qiu)：無振動(dong)、無氣流影響及水平臺面上。

天平要有使(shi)用及運行(xing)檢(jian)查記(ji)錄。

天(tian)平(ping)作(zuo)為計量儀器(qi)是列入國家強(qiang)制(zhi)檢定的范圍，一般1次/年進行檢定。

運行檢查(cha)頻率按運行計(ji)劃或按產品（天平生(sheng)產廠家）給(gei)出(chu)的(de)標準重量單位(wei)進行對照

5、pH計

pH計使用前應用標準(zhun)液進行(xing)校準(zhun)。

緩沖液(ye)使(shi)用有效(xiao)期：pH4.00 約1年

pH7.00 約6個月

pH9.00 約6個(ge)月(yue)

電(dian)極敏(min)感性檢測及(ji)極性恢(hui)復。

6、凈化(hua)工作(zuo)臺的控制

水平流(liu)凈(jing)化工(gong)作(zuo)臺(tai)工(gong)作(zuo)區域，要求潔凈(jing)度為100級。空氣(qi)沉降30min，細(xi)(xi)菌(jun)數＜1個(ge)/皿(min)。垂直流(liu)凈(jing)化工(gong)作(zuo)臺(tai)，細(xi)(xi)菌(jun)數＜0.49個(ge)/皿(min).

凈化工(gong)作臺運行檢查頻次：1次/月主要是細菌沉降檢測(ce)。

凈(jing)化工作臺高效過濾(lv)膜一般為(wei)一年更(geng)換一次(ci)，并同時進行粒子與(yu)細菌沉降(jiang)檢測。 

7、紫(zi)外(wai)線燈的控制

檢測方法：儀器(qi)測試法和生物測試法。前者是(shi)通過專(zhuan)用儀器(qi)檢測紫外(wai)燈管發射的紫外(wai)光強度。國家(jia)消毒(du)技術(shu)規(gui)范中表(biao)明在距(ju)離照射無1米處，要求其強度為(wei)90。

生物測試(shi)法：采用一(yi)定(ding)的菌(jun)(jun)培養物，經一(yi)定(ding)比例(li)稀(xi)釋，菌(jun)(jun)量控(kong)制在200-250個/0.5mL，涂布平板在紫外燈光下照射，2min，同時(shi)設置(zhi)普通光源的對照組，后置(zhi)37℃48h，計算其殺滅率。要求殺滅率達99%。

8、顯(xian)微(wei)鏡的(de)控(kong)制

顯微鏡應制定作業指導(dao)書，日常維護記錄(lu)(lu)及自校記錄(lu)(lu)。

顯微(wei)鏡應置于(yu)無(wu)振動，避免灰塵，防潮等要求(qiu)的環(huan)境。

9、其(qi)它(ta)微生物檢測專用儀器的控制(zhi)

細菌鑒定(ding)儀、酶標(biao)儀等(deng)設備，工作中常用(yong)陽性對照檢測其功能正(zheng)常性。

儀器的檢定則按(an)有關(guan)的部門(men)檢定或按(an)自校作業(ye)指(zhi)導書(shu)進行。

儀器的使用登記、校準(zhun)(zhun)計劃(hua)、校準(zhun)(zhun)記錄等文件存檔。

儀器(qi)專人使用、操作者應(ying)取(qu)得相應(ying)的崗位培訓合格，持(chi)證(zheng)上崗。

正確進(jin)行培(pei)養基質量控(kong)制，并作為(wei)一項經(jing)常性的(de)工作，建立完整的(de)檢驗資(zi)料，是實驗室今后通(tong)過(guo)相(xiang)應級(ji)別(bie)的(de)認證，在整個檢驗質量控(kong)制體(ti)系中所(suo)必須具(ju)備的(de)文件(jian)資(zi)料。

1、常用培養基的質量(liang)控制

檢驗項目與方法：對新批號的干燥培(pei)養基物理、化學及生物學指標鑒定

A：感官(guan)（外觀）研細程度(du)(du)和(he)顏色（溶解(jie)前后），透明度(du)(du)，雜質(zhi)等；

B：PH測定，按各(ge)種(zhong)培(pei)養基(ji)要求的(de)PH±0.2，蒸餾(liu)水的(de)PH應(ying)在6.4-7.0之間。

C：生物學指標檢定，被(bei)檢培養(yang)基(ji)相應細菌(jun)生長率測試；菌(jun)落大小(xiao)及特(te)征的檢測。

生長(chang)率測試：適用與液(ye)體和(he)固體培養(yang)(yang)基(ji)：將菌(jun)培養(yang)(yang)液(ye)，用生理(li)鹽水做倍比(bi)稀(xi)釋，取(qu)合適稀(xi)釋度(du)進行平(ping)板計數或接(jie)種被檢(jian)的培養(yang)(yang)基(ji)試管，同時以按相(xiang)關的培養(yang)(yang)基(ji)國標配方新(xin)鮮(xian)配制的培養(yang)(yang)基(ji)進行對照。不(bu)低(di)與10%。

菌(jun)落(luo)大(da)小測試：劃線(xian)分離測試菌(jun)，取10個菌(jun)落(luo)測量直徑大(da)小，其(qi)直徑均值與新鮮配(pei)制的培養基無(wu)統(tong)計學差異。

2、常用培養(yang)基質量標準

外(wai)觀(guan)和(he)理化標(biao)準(zhun)：

干粉(fen)顏色：淡(dan)黃(huang)色粉(fen)末或(huo)呈現本培養基特有(you)的(de)顏色

溶解后培(pei)養基色(se)澤：清晰透(tou)明（含瓊脂除外）淡黃色(se)或特有的色(se)澤；

滅(mie)菌后(hou)的培(pei)養基PH：7.2±2℃為多；個別弧(hu)菌檢驗(yan)用培(pei)養基pH值偏高為：8.0 ±2℃

生(sheng)物學指標(biao)：菌落特(te)征(zheng)及菌落大小 。

3、培養基保(bao)存環(huan)境(jing)

制成的(de)培(pei)養基(ji)保(bao)存(cun)環(huan)境為4℃冰箱，如制成平板則(ze)用(yong)塑料袋(dai)包裝(zhuang)置冰箱保(bao)存(cun)，干燥培(pei)養基(ji)干粉含有活性物(wu)質(zhi)、遇熱(re)易(yi)分(fen)解的(de)物(wu)質(zhi)應仔細查(cha)看存(cun)放條件(jian)，多數也(ye)須放在2-8 ℃條件(jian)保(bao)存(cun)。

有的(de)培養(yang)(yang)基則以存放于10-15 ℃條件(jian)為(wei)易。如含有高(gao)濃度膽鹽的(de)培養(yang)(yang)基。

4、培養基制(zhi)備控制(zhi)程序

培養基(ji)配制所(suo)(suo)用的(de)(de)儀(yi)器(qi)設(she)備培養基(ji)配制所(suo)(suo)用的(de)(de)儀(yi)器(qi)設(she)備必(bi)須經過相應的(de)(de)鑒(jian)定 。

配(pei)制(zhi)培養基(ji)(ji)所用(yong)的用(yong)具及(ji)(ji)容器配(pei)制(zhi)培養基(ji)(ji)所用(yong)的用(yong)具及(ji)(ji)容器必(bi)須是清潔(jie)(jie)或是滅菌的，一些特殊不易洗(xi)(xi)刷清潔(jie)(jie)的玻(bo)璃器皿，必(bi)要時可(ke)用(yong)重鉻酸鉀硫酸清潔(jie)(jie)浸(jin)泡后(hou)，取出置5%氫氧化鈉溶(rong)液浸(jin)泡數分鐘，再用(yong)3%鹽(yan)酸溶(rong)液進行中和，然后(hou)用(yong)清水(shui)沖洗(xi)(xi)，烘干(gan)后(hou)備(bei)用(yong)。

5、培養(yang)基配制原料，試劑質量(liang)控制

配制好的(de)培(pei)養(yang)基（尤其是糖發酵管）不宜(yi)久(jiu)放。，因為(wei)培(pei)養(yang)培(pei)養(yang)基吸收空氣中的(de)二氧化碳(tan)，會(hui)使培(pei)養(yang)基變酸，從(cong)而影響細菌的(de)生(sheng)長。

培養基中(zhong)的抑制劑(ji)及指示劑(ji)一定要精確稱(cheng)量(liang)，抑制劑(ji)要注意合理配伍。 

6、培(pei)養基主(zhu)要原料的質(zhi)量控制

配制培養(yang)基(ji)的(de)主要(yao)原料有蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏、膽鹽、無機鹽和(he)瓊脂等，這些主要(yao)原料的(de)有劣，直接影(ying)響(xiang)到培養(yang)基(ji)的(de)質量，由此也將影(ying)響(xiang)檢驗質量。

指標有感(gan)官、理化、物理、生物學。

定期使(shi)用(yong)有(you)證(zheng)標(biao)準(zhun)物質(zhi)和次級標(biao)準(zhun)物質(zhi)（參考物質(zhi)）進(jin)行內部質(zhi)量控制。實驗室間的比對或能力驗證(zheng)，利(li)用(yong)相(xiang)同(tong)(tong)或不同(tong)(tong)方(fang)法進(jin)行重復檢(jian)(jian)測，對留存的樣品進(jin)行在檢(jian)(jian)測。

1、菌落計(ji)(ji)數(shu)精(jing)密(mi)度控制(zhi)直接計(ji)(ji)數(shu)

選擇同一(yi)標本，要求檢驗人(ren)員進行菌落計數。

將大腸菌（25922）或經(jing)檢定標化的(de)菌片，通過合(he)適的(de)梯度稀(xi)釋，選擇合(he)適的(de)稀(xi)釋度進(jin)行菌落(luo)計數(shu)實驗操作。36±1℃培養24h進(jin)行菌落(luo)計數(shu)。

菌落(luo)計數精(jing)密度控制重復計數法

2、重復計數要求

自身(shen)同一平皿重復計數誤差 小于(yu)7.7%

實驗人員之間同(tong)一(yi)平皿重復計數(shu)誤差 ±18 .2%

自身同(tong)一梯度平行(xing)加樣兩皿(min)間相對誤 小于(yu)7.7%

實驗(yan)人(ren)員之(zhi)間同一梯度(du)計數誤差X±18 .2%范(fan)圍(wei)

不同梯度間菌(jun)落計數最終誤差 小于7.7%

3、菌種鑒(jian)定質控

菌(jun)種(zhong)鑒(jian)定(ding)質(zhi)控要求，對所給(gei)的(de)微(wei)生物菌(jun)種(zhong)，按有關的(de)方(fang)法及指標(biao)進行生化(hua)、血清等方(fang)面的(de)鑒(jian)定(ding)。

鑒(jian)定質量評價：鑒(jian)定程序是(shi)(shi)否正(zheng)確；鑒(jian)定方法是(shi)(shi)否正(zheng)確；具(ju)體(ti)操(cao)作技術是(shi)(shi)否熟(shu)練，結(jie)果報告是(shi)(shi)否正(zheng)確。每一項設立(li)分(fen)值為(wei)25分(fen)。總(zong)分(fen)為(wei)100分(fen)。

4、內部(bu)質量控制的推(tui)薦頻(pin)率(lv)

菌(jun)落計數(shu)精密度控制：1次/3月；

菌種鑒定控制：1次/半年或(huo)1年

盲樣測(ce)定丟失的對照 1次/半年

1、培訓與告之

    實(shi)驗室(shi)管(guan)理人(ren)員及實(shi)驗人(ren)員必(bi)(bi)須了解相關(guan)工(gong)作有(you)關(guan)的(de)(de)危險。對招收新(xin)(xin)職工(gong)、工(gong)作開始發(fa)生(sheng)變化或使用新(xin)(xin)方法，啟(qi)用新(xin)(xin)的(de)(de)設備時，這點尤(you)為重要(yao)(yao)。所有(you)工(gong)作人(ren)員，包(bao)括清(qing)潔和服務(wu)人(ren)員都要(yao)(yao)知(zhi)道。需要(yao)(yao)進行口頭和書面(mian)兩種方式的(de)(de)通知(zhi)。有(you)關(guan)儀器必(bi)(bi)須要(yao)(yao)有(you)字跡清(qing)楚(chu)其(qi)安全使用的(de)(de)書面(mian)說明。

2、標(biao)志

在進行致病(bing)性微生(sheng)物工作(zuo)的房間人(ren)口處必須(xu)要有警示標志。

實(shi)驗室的房間必須(xu)(xu)以(yi)使(shi)(shi)與(yu)微生(sheng)物有關的危險(xian)得以(yi)過免的方式裝置，以(yi)使(shi)(shi)微生(sheng)物的傳(chuan)播得到限制，房間還(huan)應便于清(qing)潔(jie)和消(xiao)除污染．工作臺必須(xu)(xu)由光(guang)滑的、耐消(xiao)毒劑的材料(liao)制成。難以(yi)清(qing)潔(jie)的角落、彎頭(tou)及管道應盡可能地避免污染。 

3、防止空氣污染

加熱(re)培(pei)養蒙或(huo)其(qi)它化學物(wu)質時，粉塵可(ke)擴做到(dao)空氣中．這可(ke)給工作人員(yuan)帶來(lai)過敏(min)反應或(huo)出現其(qi)它問題．因此，設計排風(feng)裝置很重(zhong)要(yao)，以至包括天(tian)平附近的抽風(feng)點(dian)。通常稱量應按(an)正確的安(an)全(quan)規程進(jin)行(xing)。 

4、有毒有害物防(fang)護

濃酸和(he)堿及其(qi)它腐蝕性(xing)化學物質和(he)毒(du)性(xing)物質必須(xu)專門保存(cun)，盡可(ke)能鎖存(cun)，以(yi)使它們引起的(de)損(sun)害減至最低(di)．

對(dui)實(shi)驗室(shi)所用的(de)所有化學物(wu)質，實(shi)驗室(shi)必須有記述其危險及操作(zuo)中可能的(de)限制的(de)產品表．

在所需的(de)范(fan)圍(wei)內工(gong)作人員必須(xu)使用(yong)人體防護(hu)(hu)裝置，防護(hu)(hu)服、手套籌．使用(yong)安全設施(shi)是實驗人員的(de)職(zhi)責(ze)污染(ran)了(le)的(de)防護(hu)(hu)員應盡快(kuai)地(di)更換(huan)，離開工(gong)作室(shi)時，必須(xu)脫(tuo)去。

5、消除污染(ran)和廢(fei)物的處理(li)

實驗室必(bi)須(xu)要有關(guan)于應如(ru)何消除濺出的微(wei)生物(wu)污染(ran)的書(shu)面說明。另外(wai)，對廢物(wu)的處理，如(ru)用過的培養(yang)皿和打碎的玻璃(li)器(qi)皿，應有固定(ding)的程序(xu)。所有被洗(xi)的物(wu)品(pin)在(zai)洗(xi)刷前均經高(gao)壓滅菌(jun)，洗(xi)滌工受微(wei)生物(wu)感染(ran)的危險就可以盡可能避免。